Direcionamento funcional e específico para resultados de nocaute de genes de alta confiança
Edit-R Lentiviral sgRNAs expressam RNA para guiar a nuclease Cas9 para criar quebras de fita dupla no DNA alvo. Na espinha dorsal do vetor sgRNA lentiviral Edit-R, o RNA guia específico do gene é expresso sob o controle de um promotor U6 humano, enquanto a expressão do marcador de resistência à puromicina (PuroR) é conduzida a partir do promotor CMV do camundongo e permite a seleção rápida de células com sgRNA integrado.
Cada sgRNA Edit-R Lentiviral é específico para o gene e local genômico de interesse. A geração de nocautes em células difíceis de transfectar ou o acompanhamento de acertos de uma tela de biblioteca de sgRNA lentiviral agrupada são as principais aplicações deste formato de guia.
Embora o CRISPR-Cas9 seja uma ferramenta altamente eficaz para interrogar a função do gene, nem todos os RNAs guia são eficazes para atingir o nocaute funcional da proteína. Para resolver esse problema, a Horizon desenvolveu um algoritmo treinado para selecionar guias que fornecem a maior probabilidade de gerar um nocaute de gene funcional, não apenas criando uma inserção ou exclusão.
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