CRISPR-Cas9 Gene Editing

  O sistema CRISPR-Cas9 utiliza pequenos RNAs de dupla fita, conhecidos como RNA guia ou gRNA, para guiar a proteína nuclease Cas9 para regiões específicas do genoma. A nuclease Cas9 tem o potencial de editar o genoma ou alterar a expressão de genes a partir de clivagens específicas. A plataforma Dharmacon Edit-R CRISPR-Cas9 permite o desenho de crRNAs específicos para o gene de interesse, através de um algoritmo próprio, de acordo com a sequência do gene. Além disso, é possível obter crRNAs pré-desenhados para genes de humanos, ratos e camundongos.  

• • 1. Para introdução em células por transfecção:
    • a. crRNA sintético (necessário adquirir o tracrRNA)
    • b. tracrRNA sintético (necessário para uso com crRNA)
    • c. Cas9 (nos formatos: plasmidial para expressão robusta / DNA-free: mRNA ou proteína para expressão transiente)
  • 2. Para introdução em células por lentivírus (células difíceis de transfectar; é necessário que o laboratório tenha nível 2 de biossegurança):
    • a. sgRNA (single-guide RNA: permite a combinação do crRNA e tracrRNA em uma única fita)
    • b. Cas9 (nos formatos: partícula viral ou plasmídeo codificando a partícula viral; para expressão robusta)

 

RNA Interference

  A Dharmacon possui ferramentas que cobrem todos os aspectos de RNA de interferência: siRNA, shRNA lentiviral, ferramentas para pesquisa de microRNA e bibliotecas de análises de escala ‘whole-genome’ para estudo funcional de genes, microRNAs e long non-coding RNAs.  

Tecnologias para shRNA

O portfólio mais amplo e avançado de shRNA para silenciamento gênico transiente e de longo prazo.

 

Tecnologias para siRNAs e microRNAs

Aumente ou diminua a expressão de determinado gene ou a função de microRNAs maduros através dos siRNAs ou microRNA Mimics.