Os kits de transcrição e triagem in vitro Guide-it para sgRNA incluem quatro kits para a produção simples, limpeza e avaliação de RNAs de guia único (sgRNAs) para estudos CRISPR/Cas9. Cada kit fornece materiais suficientes para 50 reações.
O kit de transcrição in vitro de sgRNA Guide-it (Cat. # 632635) é usado para produzir altos rendimentos de sgRNAs por meio de transcrição in vitro . Este kit também inclui o kit de limpeza de RNA Guide-it IVT (Cat. # 632638), que é usado para purificar rapidamente o sgRNA após reações de transcrição in vitro (IVT). O sgRNA purificado deste kit está pronto para uso direto em ensaios de transfecção, eletroporação ou clivagem in vitro .
O O kit de triagem de sgRNA Guide-it (Cat. # 632639) permite testar a eficácia de diferentes RNAs de guia único (sgRNAs) in vitro antes de usá-los em estudos envolvendo edição de genes mediada por Cas9, para que você não perca tempo com entrega ineficaz sgRNAs para suas células. Com este kit, um modelo contendo um sítio alvo de sgRNA é criado por PCR, então combinado com um sgRNA que você deseja testar e nuclease Cas9 recombinante. A eficiência com que a nuclease Cas9 cliva o molde pode ser medida usando eletroforese em gel de agarose.
O Guide-it Complete sgRNA Screening System (Cat. # 632636) inclui todos os componentes do kit descritos acima e é usado para sintetizar e testar a eficácia de RNAs de guia único (sgRNAs). O kit contém todos os reagentes necessários para in vitro transcrever e purificar sgRNAs e testar sua eficácia contra um fragmento alvo de PCR usando nuclease Cas9 recombinante.