AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2), 1 System
R$13.275,90
AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2) é um sistema completo para entrega de genes que codificam os componentes necessários para a edição de genoma mediada por CRISPR/Cas9 (ou seja, sgRNA e Cas9 nuclease) para células de mamíferos. O conjunto de vetores AAVpro CRISPR/Cas9 incluído consiste em dois plasmídeos (pAAV-Guide-it-Up e pAAV-Guide-it-Down) cada um contendo uma porção truncada, a montante ou a jusante do gene Cas9 com uma região de 1,6 kb de homologia. Devido à natureza do genoma do AAV, quando as células alvo são transduzidas com ambos os vírus (Up e Down), a recombinação ocorre na região de homologia para criar um gene Cas9 completo com um promotor CMV a montante. O pAAV-Guide-it-Down é fornecido pré-linearizado para clonagem simples de uma sequência de sgRNA específica do alvo sob o controle do promotor U6 humano.
Disponível por encomenda
Visão geral
- A entrega viral do gene Cas9 e um sgRNA permite a edição do genoma em células de mamíferos difíceis de transfectar, incluindo células proliferantes e não proliferativas
- A entrega de AAV de Cas9 impede a integração genômica e a expressão persistente de Cas9, reduzindo os efeitos fora do alvo
- A expressão de microRNA humano miR-342 a partir do plasmídeo de empacotamento aumenta significativamente o título de AAV
- A solução de extração de AAV também está incluída para o isolamento eficiente de partículas virais de AAV2
Mais Informações
AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free Systems (com S. pyogenes Cas9)
- O gene SpCas9 é dividido entre os plasmídeos pAAV-Guide-it-Up e pAAV-Guide-it-Down com uma região de homologia de 1,6 kb; a região homóloga resulta em recombinação em células-alvo, produzindo um gene SpCas9 de comprimento total
- O SpCas9 usa a sequência NGG do Protospacer Adjacent Motif (PAM) onde N é qualquer base – consulte o Manual do usuário dos sistemas AAVpro CRISPR/Cas9 para obter detalhes
- O plasmídeo pAAV-Guide-it-Down é fornecido pré-linearizado, facilitando a clonagem em etapa única de sgRNAs com fundo reduzido devido à religação do plasmídeo
Sistemas AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free (com S. aureus Cas9)
- O gene SaCas9 se encaixa em um único plasmídeo, pAAV-Guide-it-1, que também contém o cassete de expressão de sgRNA
- SaCas9 (de Staphylococcus aureus ) usa a sequência PAM NNGRR(T) onde N é qualquer base, R é uma base A ou G e o (T) é fortemente preferido – consulte o Manual do Usuário do AAVpro CRISPR SaCas9 Systems para obter detalhes
- O plasmídeo pAAV-Guide-it-1 é fornecido pré-linearizado, facilitando a clonagem em etapa única de sgRNAs com fundo reduzido devido à religação do plasmídeo
Formulários
- Entrega baseada em AAV de um sgRNA e Cas9 definido pelo usuário para edição de genoma de mamífero usando a tecnologia CRISPR/Cas9
Componentes
- AAVpro CRISPR/Cas9 Helper Free System (AAV2) (Cat. # 632608)
- Conjunto de vetores AAVpro CRISPR/Cas9
- Componentes de Ligação Guide-it
- Células Competentes Estelares
- Vetor pRC2-mi342
- Vetor de ajudante de pH
- Solução de extração AAVpro
- Sistema vetorial AAVpro CRISPR/Cas9 (Cat. # 632609)
- Conjunto de vetores AAVpro CRISPR/Cas9
- Componentes de Ligação Guide-it
- Células Competentes Estelares
- AAVpro CRISPR/SaCas9 Helper Free System (AAV2) (Cat. # 632619)
- Conjunto de vetores AAVpro CRISPR/SaCas9
- Componentes de Ligação Guide-it
- Células Competentes Estelares
- Vetor pRC2-mi342
- Vetor de ajudante de pH
- Solução de extração AAVpro
- Sistema vetorial AAVpro CRISPR/SaCas9 (Cat. # 632618)
- Conjunto de vetores AAVpro CRISPR/SaCas9
- Componentes de Ligação Guide-it
- Células Competentes Estelares
Informações adicionais do produto
Consulte o Certificado de Análise do produto para obter informações sobre as condições de armazenamento, componentes do produto e especificações técnicas. Consulte a Lista de componentes do kit para determinar os componentes do kit. Os Certificados de Análise e as Listas de Componentes do Kit estão localizados na guia Documentos.
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