- Tamanho
- 1mL
- Armazenamento
- O kit deve ser armazenado a -20°C por pelo menos um ano. Evite congelamento e descongelamento repetidos. Para uso frequente, a quantidade apropriada pode ser armazenada a 4°C por pelo menos 3 dias.
- Procedimento de ensaio
- 一. O sistema de reação PCR foi criado:
1. Derreta e misture as soluções necessárias para a reação de PCR. Coloque o Hi-Fi PCR Master Mix (2X) em um banho de gelo ou em uma caixa de gelo.
2. Consulte a tabela abaixo para configurar o sistema de reação de PCR em condições de banho de gelo.
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Reagentes Concentração final volume (μL) volume (μL) água destilada dupla ou água Milli-Q – 21-x 8,4 anos DNA do modelo 10pg-1μg x e Mistura de primer (10μM cada) 0,8μM 4 1.6 Mistura mestre de PCR Hi-Fi (2X) 1X 25 10 Volume total – 50 20 Nota: A dosagem recomendada de volume de reação de 50μl para diferentes tipos de modelos é a seguinte:DNA genômico de mamíferos: 0,1-1μg; DNA genômico de Escherichia coli: 10-100ng; DNA plasmidial: 0,1-10ng.
- 3. Sopre suavemente e misture com uma pipeta, centrifugue em temperatura ambiente por alguns segundos.
- 4. Coloque o líquido de reação de PCR no instrumento de PCR para iniciar a reação de PCR.
- 二.A configuração dos parâmetros de reação de PCR pode ser referida da seguinte forma:
- PASSO 1 (desnaturação inicial): 92 °C 3min PASSO 2 (desnaturação): 92 °C 30 seg PASSO 3 (recozimento): 55 °C 30 seg PASSO 4 (extensão): 68 °C 15-60s / kb PASSO 5 (ciclo): Vá para o PASSO 2 por 30-35 ciclos PASSO 6 (extensão final): 68 °C 10min PASSO 7 (armazenamento temporário): 4 °C para sempre
- Nota: O tempo da etapa de extensão precisa ser definido de acordo com o comprimento do produto PCR. Para a amplificação de fragmentos de DNA menores que 6kb, o tempo de extensão recomendado é de 15 segundos por kb. Ao amplificar fragmentos de DNA maiores que 6kb, o tempo de alongamento recomendado é de 1 minuto por kb.
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Hi-Fi PCR Master Mix (2X), 1mL
Hi-Fi PCR Master Mix (2X) usa DNA polimerase de alta fidelidade, a taxa de amplificação pode chegar a 15s / kb, contém 2X Hi-Fi DNA polimerase, 2X PCR Buffer (com Mg2 +), 2X dNTP, só precisa adicionar a quantidade certa de primers, modelos e água para realizar a amplificação de PCR de alta fidelidade. A operação de PCR é bastante simplificada, a operação é mais rápida, a poluição que pode ser causada durante a operação de PCR é reduzida e a repetibilidade do PCR é melhor.
O produto pode realizar uma variedade de amplificação de PCR convencional e é particularmente adequado para amplificação de PCR qualitativa e semiquantitativa rápida e de alta fidelidade, bem como para a amplificação de longos fragmentos de DNA (até 12kb de comprimento).
A velocidade de amplificação é extremamente rápida. Quando a amplificação de fragmentos de DNA menores que 6kb, a extensão de 1kb leva apenas 15 segundos. O alongamento normal da DNA polimerase de 1kb geralmente leva de 1 a 2 minutos. Sua probabilidade de erro é 52 vezes menor que a da enzima Taq e 6 vezes menor que a da enzima pfu.
Este produto tem alta estabilidade e não tem efeito significativo na amplificação de PCR após congelamento e descongelamento repetidos por 15 vezes.
Para o sistema de reação PCR de 50 microlitros, o tamanho de 1mL é suficiente para 40 amostras; Para 20 microlitros de sistema de reação PCR, suficiente para 100 amostras.
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illustra PuReTaq Ready-To-Go PCR Beads
Os reagentes de PCR liofilizados e pré-formulados e pré-dispensados são misturados em um formato de esfera para desempenho robusto e reprodutível em amplificações de PCR padrão.
- Economize tempo: basta adicionar a solução de DNA modelo e os primers e fazer o ciclo.
- Resultados mais reprodutíveis: menor risco de erros de pipetagem e contaminação.
- Polimerase de DNA puReTaq de alta qualidade e reagentes de alta pureza: desempenho robusto e os níveis mais baixos possíveis de DNA contaminante.
- Estável à temperatura ambiente a longo prazo: não é necessário espaço no congelador; menor consumo de energia para transporte e armazenamento.
- Verificado para PCR em tempo real.
- Para desempenho altamente robusto e reprodutível em aplicativos PCR padrão.
Descrição
As esferas de PCR prontas para uso PuReTaq são reações de dose única pré-misturadas, pré-dispensadas e otimizadas para realizar amplificações de PCR padrão. O uso de polimerase de DNA PuReTaq recombinante e outros reagentes de alta pureza garantem um desempenho confiável e robusto em amplificações de PCR baseadas em fluorescência em tempo real e ponto final, e garante os níveis mais baixos possíveis de ácidos nucleicos procarióticos e eucarióticos contaminantes.
As esferas de PCR puReTaq Ready-To-Go são pré-formuladas para garantir maior reprodutibilidade entre as reações, minimizar as etapas de pipetagem e reduzir o potencial de erros de pipetagem e contaminação. Os únicos reagentes adicionais necessários são água, primers e DNA modelo. As esferas são fornecidas pré-dispensadas em tubos de PCR de 0,2 ml ou 0,5 ml. Os tubos de 0,2 ml também são fornecidos em formato de placa de 96 poços (8 × 12) que permite que tiras individuais de oito tubos sejam facilmente removidas. Essa flexibilidade permite o uso de toda a placa de 96 poços, tiras de oito ou tubos individuais de 0,2 ml.
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O Premix Ex Taq da marca Takara é um master mix otimizado de 2X PCR composto pela mistura de polimerase Takara Ex Taq, tampão de reação Ex Taq (Mg 2+ ) e mistura de dNTP. O Premix Ex Taq foi projetado para montagem rápida e fácil (somente por diluição) do master mix de PCR.
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- Nenhum produto de amplificação de fundo independente do modelo;
- Supera as técnicas de amplificação de genoma completo baseadas em PCR;
- Protocolo rápido e simples de fácil automação; nenhum termociclador necessário;
- Produz DNA de alta qualidade (por exemplo, para genotipagem de alto rendimento, hibridização e arquivamento de DNA).
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illustra Hot Start Master Mix
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- Evita o risco de contaminação de uma fonte mamífera associada a anticorpos de partida a quente.
- A mistura conveniente e pronta para uso economiza tempo e reduz a variabilidade experimental.
- Confiança nas aplicações downstream; maior comprimento de leitura em aplicativos de sequenciamento.
- Para qualquer reação de PCR padrão, como PCR multiplex, e reações que exibem amplificação não específica ou formação de dímero de primer.
Descrição
O illustra Hot Start Master Mix usa um novo método de partida a quente chamado sequestro de primer.
O Illustra Hot Start Master Mix combina a Taq DNA Polymerase recombinante de alta qualidade, uma proteína recombinante ativadora de hot start e nucleotídeos em um buffer de reação patenteado. Essa mistura pronta para uso oferece desempenho robusto e confiável para aplicações de PCR exigentes nas quais alta especificidade e alta sensibilidade são essenciais para o sucesso. A mistura não contém anticorpo Taq e isso elimina o risco de contaminação de origem mamífera. Além disso, uma vez que a polimerase não é quimicamente inativada, não há necessidade de uma extensa etapa de aquecimento de pré-ciclagem; isso reduz a chance de danificar preciosas amostras de DNA da depurinação induzida pelo calor. O resultado final do uso do Illustra Hot Start Master Mix é uma amplificação mais robusta e confiável dos amplicons alvo com maior rendimento quando comparado aos produtos convencionais de hot start master mix.
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