HOT FIREPol DNA Polymerase, 1000U
Descrição
HOT FIREPol é inativo à temperatura ambiente e é ativado por uma etapa de incubação de 15 min a 95 ° C. Isso permite a PCR de inicialização a quente e minimiza o mispriming e a extensão de primers e dímeros de primer não especificamente recozidos. Recomendado para aplicações de rotina (fragmento de até 5 kb).
Possui 5 ′ → 3 ′ polimerase e 5 ′ → 3 ′ atividade de exonuclease, bem como uma atividade de transferase terminal não dependente do modelo, mas não possui uma atividade de 3 ′ → 5 ′ exonuclease (revisão) tornando o produto gerado adequado para TA- clonagem.
A fidelidade de HOT FIREPol é semelhante a uma Taq DNA polimerase regular (taxa de erro por nucleotídeo aprox. 2,5 x 10 -5 ).
Propriedades
- Concentração: 5 U / µl;
- Hot-start, ativado por uma etapa de incubação de 15 min a 95 ° C;
- A taxa de erro por nucleotídeo por ciclo é de aprox. 2,5 x 10 -5
- A precisão é app. 4 x 10 4
- Tampão de armazenamento e diluição: glicerol a 50% (v / v), Tris-HCl 20 mM pH
- Purificado de uma cepa de E. coli que carrega um plasmídeo superprodutor contendo um gene modificado de Thermus aquaticus DNA Polimerase.
Reagentes
- HOT FIREPol DNA Polimerase (5 U/ul) em Tris-HCl 20 mM pH 8,7 a 25ºC, KCl 100 mM, EDTA 0,1 mM, glicerol 50% (v / v) e estabilizantes;
- HOT FIREPol 10x Tampão B1 (sem Mg 2+ e detergente): 0,7 M Tris-HCl, 0,175 M (NH 4 ) 2 SO 4 .
- FIREPol 10x Tampão B2 (sem Mg 2+ ): Tris-HCl a 0,7, 0,175 M (NH 4 ) 2 SO 4 , 0,2% w / v de Tween-20. HOT FIREPol 10x Buffer B2 contém detergente não iônico que suprime os efeitos inibitórios do traço de tampões de extração de DNA e aumenta o rendimento e a eficiência da PCR.
- MgCl 2 25 mM
- 10x Solution S é um aditivo que facilita a amplificação de modelos difíceis (por exemplo, modelos de DNA ricos em GC). Esta solução deve ser usada em uma concentração final definida (solução 1x, 2x ou 3x). A solução 10x S NÃO é um tampão de reação e deve ser usada SOMENTE SE ocorrer uma amplificação não específica.
