Este kit é baseado no método de detecção ELISA competitivo e leva 2 horas para o ensaio. A microplaca fornecida neste kit já vem pré-revestida com anticorpo anti-AMY1. A amostra ou o padrão são misturados completamente com uma quantidade fixa de solução de trabalho de AMY1 marcada com biotina e adicionados a cada poço. O AMY1 presente na amostra ou no padrão compete com o AMY1 marcado com biotina pela ligação ao anticorpo pré-revestido na microplaca. Os componentes livres são removidos por lavagem. Após a adição do conjugado HRP-estreptavidina (SABC), o conjugado não ligado é removido por lavagem. Adiciona-se a solução de substrato TMB. O TMB é então catalisado pela HRP para produzir um produto de cor azul que se torna amarelo após a adição da solução de parada. A absorbância (DO) a 450 nm é lida em um leitor de microplacas. O valor de DO450 da amostra é comparado com a curva padrão por meio de um software de ajuste de curvas para determinar a concentração de AMY1 na amostra. A concentração da substância alvo é inversamente proporcional ao valor de DO450.