Mouse Anti-Dengue Virus NS1 Serotype 1 (BA11), 500μg

ANTICORPO MONOCLONAL DE CAMUNDONGO ANTI-DENGUE VÍRUS NS1 SOROTIPO 1 (BA11):

O anticorpo monoclonal de camundongo anti-vírus da dengue sorotipo 1 (BA11) reconhece a proteína NS1 protein da dengue sorotipo 1.

DETALHES DO PRODUTO:

• Anticorpo monoclonal de camundongo contra o vírus da dengue NS1 sorotipo 1 (BA11).
• O Immugen era um conjunto de proteínas NS1 de todos os quatro sorotipos do vírus da dengue.
• Esse anticorpo reconhece a proteína NS1 do DENV1. Não apresenta reatividade cruzada no ELISA com NS1 dos sorotipos 2, 3 ou 4 do DENV, ZIKV, WSLV, TBEV, JEV, SLEV, POWV, USUV, WNV e YFV.
• No western blot, ele detecta NS1 para todos os quatro sorotipos de DENV e NS1 do vírus da encefalite de St.

ESTRUTURA:

A dengue é causada por um dos quatro sorotipos diferentes de pequenos vírus de RNA da família Flaviviridae, DENV1-4. A NS1 é uma das principais proteínas não estruturais expressas pelo vírus da dengue. O monômero NS1 é uma proteína glicosilada de aproximadamente 45kD, que se associa a lipídios e forma um homodímero dentro das células infectadas.

Ela é necessária para a replicação viral e também é secretada no espaço extracelular como uma partícula de lipoproteína hexamérica, que está envolvida na evasão imunológica e na patogênese por meio da interação com componentes dos sistemas imunológicos inato e adaptativo, bem como com outros fatores do hospedeiro.

O NS1 é um dos principais marcadores antigênicos da infecção viral da dengue. Ela é secretada por células infectadas e é encontrada no soro em níveis detectáveis que se sobrepõem ao pico de viremia e à detecção de RNA. Isso também coincide com o início da detecção de IgM em casos agudos primários e IgG em casos agudos não primários.

Níveis elevados de NS1 no soro indicam diretamente o aumento da carga viral e indicam uma correlação positiva entre a viremia e os perfis de NS1 (Ambrose et al., 2017).

A dengue é classificada pela Organização Mundial da Saúde (OMS) como a doença viral transmitida por mosquitos mais crítica do mundo. Mais de 40% da população mundial, em mais de 100 países, correm o risco de contrair a dengue. As epidemias de dengue mais significativas dos últimos anos ocorreram no Sudeste Asiático, nas Américas e no Pacífico Ocidental.

A cada ano, estima-se que ocorram 390 milhões de infecções por dengue em todo o mundo. Desses, 500.000 casos evoluem para a febre hemorrágica da dengue – uma forma mais grave da doença, que resulta em até 25.000 mortes por ano.

Com mais de um terço da população mundial vivendo em áreas de risco de transmissão, a infecção por dengue é uma das principais causas de doença e morte nas regiões tropicais e subtropicais (WHO for Guidelines for Diagnosis, Treatment, Prevention & Control, 2009).

Cerca de 100 milhões de pessoas são infectadas anualmente. A dengue é causada por qualquer um dos quatro vírus relacionados transmitidos por mosquitos. Não há vacinas disponíveis para prevenir a infecção pelo vírus da dengue.

IMAGENS:

• Western Blot: 100ng de cada antígeno foram usados para SDS-PAGE, na forma reduzida. As proteínas foram transferidas usando Transblot por 7 minutos a 25V. Leite seco a 5% em PBS-T foi usado como tampão de bloqueio e tampão de diluição para anticorpos. Os anticorpos primários são apresentados abaixo, e o anticorpo secundário de cabra anti-camundongo-IgG-HRP (Biorad 103005) foi usado a 1:1000. Todas as etapas foram realizadas durante 1 hora em temperatura ambiente com agitação suave. O TMB de membrana KPL foi usado para detecção. Tempo de revelação: 30 segundos. O anticorpo detectou a proteína NS1 para todos os quatro sorotipos do vírus da dengue e para o vírus da encefalite de St.

• ELISA: Todos os antígenos NS1 revestidos a 0,5 µg/ml em DPBS por 2 horas à temperatura ambiente. A placa foi lavada 1X 300µl/poço em TBS + 0,1% Tween20, bloqueada 300µl/poço em DPBS+1% BSA por 1h. Anticorpo diluído a 1,0 µg/ml e 0,01 µgml em DPBS + 1% BSA + 0,05% T20. Adicionado a 100 µl/poço, incubado e agitado por 2 horas em temperatura ambiente. A placa foi lavada 3 vezes com 300 µl/poço de tampão de lavagem TBS-T. Anticorpo secundário Biorad cabra anti-camundongo IgG-HRP (103005) diluído 1:2500 em DPBS/1%BSA/0,05%T20, adicionado a 100 µl/poço, incubado e agitado por 1 hora em temperatura ambiente. A placa foi lavada 6 vezes com 300 µl/poço de tampão de lavagem TBS-T. Detecção pelo substrato Europa TMB, adicionado a 100 µl/poço e a placa desenvolvida por 3 min. estática na bancada. A reação foi interrompida com 100 µl/poço de HCL 1M e a placa foi lida em 4 minutos a 405 nm.