mRNA Capping Kit (25 rxns)

Este produto contém enzima de encapsulamento do vírus vacínia, estrutura de encapsulamento de mRNA 2′-O-metiltransferase e outros componentes de reação de encapsulamento, que podem ser usados ​​para modificação de encapsulamento 5′ do RNA produzido pela transcrição in vitro T7 (JT101).

Em eucariotos, após a transcrição para formar o mRNA original, uma estrutura especial de cap precisa ser formada na extremidade 5′. Essa estrutura desempenha um papel importante na estabilidade, transporte (saída) e tradução do mRNA. A modificação de capping da extremidade 5′ do RNA pela reação enzimática de enzimas de capping é um método simples e eficaz: a enzima de capping da vacínia pode anexar o cap de 7-metilguanilato (m7Gppp, Cap0) à extremidade 5′ do RNA para formar m7Gppp5’N-mRNA (Cap0-mRNA). O mRNA Cap 2′-O-metiltransferas usa CAP0-mRNA como substrato e SAM (S-adenosina metionina) como doador de metil para metilar 2′-oh do primeiro nucleotídeo da extremidade 5′ do cap0-mrna adjacente à estrutura de cap para formar Cap1-mRNA.

A estrutura do Cap1 pode melhorar a estabilidade do mRNA, o que ajuda a aumentar sua capacidade de expressão em experimentos de transfecção celular e microinjeção.

Este produto utiliza a enzima de encapsulamento do vírus vacínia e a mRNA Cap-2′-O-metiltransferase simultaneamente na reação de encapsulamento, permitindo que a reação de encapsulamento seja concluída na mesma reação. O produto da reação é o mRNA Cap1, e a eficiência de encapsulamento pode ser próxima de 100% com a orientação correta da cap.

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