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PCR Master Mix (Green, 2X), 1mL

PCR Master Mix (Green, 2X), 1mL

R$335,44

O PCR Master Mix (Verde, 2X) usa um corante azul e laranja particularmente conveniente (4kb e 50bp, respectivamente) e contém 2X Taq DNA Polimerase, 2X PCR Buffer, 2X dNTP e 2X Loading Buffer, só precisa adicionar primer apropriado, modelo e água para amplificação de PCR, após a amplificação pode ser diretamente na eletroforese da amostra.

O produto é principalmente adequado para amplificação convencional por PCR de cDNA ou DNA genômico, especialmente para amplificação qualitativa ou semiquantitativa por PCR, e também pode ser usado para amplificação e clonagem de fragmentos de DNA com menos de 2kb de comprimento. Fragmentos de até 8kb podem ser amplificados, mas geralmente é melhor usado para amplificar fragmentos de DNA abaixo de 2kb.

Corantes traçadores eletroforéticos de azul e laranja (verde em geral) são adicionados ao produto, e seus locais de migração no gel de agarose a 1% são de aproximadamente 4kb e 50bp, respectivamente. A detecção eletroforética pode ser realizada diretamente após a PCR, sem a necessidade de adicionar tampão de amostra. Os corantes traçadores azuis e laranja não afetam a observação e detecção das bandas de DNA correspondentes.

Este produto tem alta estabilidade e não tem efeito significativo na amplificação de PCR após congelamento e descongelamento repetidos por 15 vezes.

Para o sistema de reação PCR de 50 microlitros, o tamanho de 1mL é suficiente para 40 amostras; Para 20 microlitros de sistema de reação PCR, suficiente para 100 amostras.

 

Manual

Disponível por encomenda

SKU: K091 Categoria: Tag:
Tamanho
1mL
Armazenamento
O kit deve ser armazenado a -20°C por pelo menos um ano. Evite congelamento e descongelamento repetidos. Para uso frequente, a quantidade apropriada pode ser armazenada a 4°C por pelo menos 3 dias.
Procedimento de ensaio
一. O sistema de reação PCR foi criado:

1. O PCR Master Mix (Verde, 2X) foi derretido à temperatura ambiente, suavemente misturado de cabeça para baixo e centrifugado em baixa velocidade por alguns segundos.

2.Consulte a tabela abaixo para configurar o sistema de reação PCR em condições de banho de gelo.

Reagentes Concentração final volume (μL) volume (μL)
água destilada dupla ou água Milli-Q – 21-x 8,4 anos
DNA do modelo 10pg-1μg x e
Mistura de primer (10μM cada) 0,8μM 4 1.6
Mistura principal de PCR (verde, 2X) 1X 25 10
Volume total – 50 20

Nota: A dosagem recomendada de volume de reação de 50μl para diferentes tipos de modelos é a seguinte:

DNA genômico de mamíferos: 0,1-1μg; DNA genômico de Escherichia coli: 10-100ng; DNA plasmidial: 0,1-10ng.

3. Sopre suavemente e misture com uma pipeta, centrifugue em temperatura ambiente por alguns segundos.

4. Coloque o líquido de reação de PCR no instrumento de PCR para iniciar a reação de PCR.

二.A configuração dos parâmetros de reação de PCR pode ser referida da seguinte forma:

PASSO 1 (desnaturação inicial): 94 °C 3min

PASSO 2 (desnaturação): 94 °C 30 seg

PASSO 3 (recozimento): 72 °C 30seg

STEP4 (extensão): 72 °C 15-60s / kb

PASSO 5 (ciclo): Vá para o PASSO 2 por 30 ciclos

PASSO 6 (extensão final): 72 °C 10min

PASSO 7 (armazenamento temporário): 4 °C para sempre

Nota: O tempo da etapa de extensão precisa ser definido de acordo com o comprimento do produto de PCR, o tempo de alongamento recomendado é de 1 minuto por kb.

三.Detecção de resultados

Após a PCR, 5-10μl foram retirados diretamente para detecção eletroforética sem adição de tampão de amostra.

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