pEASY®-Blunt El Expression Kit (10 rxns)
R$1.054,20
pEASY®– Vetor de Expressão Blunt El é construído a partir do vetor pET e utiliza uma estratégia de clonagem blunt altamente eficiente de cinco minutos para clonar o produto de PCR em um vetor de expressão altamente eficiente. O tamanho do inserto de controle é de 750 pb e a proteína alvo expressa é de cerca de 27 kDa.
• Ligação rápida de 5 minutos de produtos de PCR amplificados por P/u.
• Resistência à ampicilina.
•Primer promotor T7 e primer terminador T7 para sequenciamento.
•Promotor lac do bacteriófago T7 para expressão de alto nível.
•Etiqueta 6xHis N-terminal para fácil purificação.
•Célula quimicamente competente e resistente ao fago Transl-Tl, alta eficiência de transformação (> 109 cfu/µg de DNA pUC19) e crescimento rápido.
•Plasmídeo de expressão El incluído como controle negativo.
Armazenar
Célula quimicamente competente resistente a fagos Trans 1-Tl a -70℃ por seis meses; outras a -20℃ por nove meses
Envio
Gelo seco (-70℃)
Disponível por encomenda
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FlyCut XbaI é expresso e purificado a partir de E. coli que carrega o gene XbaI recombinante. Seu peso molecular é de 24,7 kDa, com o local de reconhecimento em T ^ CTAGA. A reação é conduzida por 5-15 minutos a 37oC e inativada por calor a 65oC por 20 minutos. Esta enzima não é sensível à metilação dcm ou CpG de mamíferos, mas é sensível à metilação dam.
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Detalhes do produto
FlyCut HindIII é expresso e purificado a partir de E. coli que carrega o gene HindIII recombinante. Seu peso molecular é de 35,8 kDa, com o local de reconhecimento em A ^ AGCTT. A reação é conduzida por 5-15 minutos a 37 ℃ e inativada pelo calor a 65 ℃ por 20 minutos. Esta enzima não é sensível à metilação dam, dcm ou CpG de mamíferos.
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Este produto é adequado para isolar miRNA e RNA total de células, tecidos, sangue fresco e exossomos. Após as amostras serem lisadas com tampão de lise, a adição de clorofórmio à amostra lisada separa a solução para uma fase aquosa incolor superior contendo RNA, uma interfase e uma fase orgânica rosa inferior. Após a adição de etanol à fase aquosa transferida, o RNA total pode ser imobilizado especificamente por uma coluna de rotação de RNA. Ao ajustar o volume de etanol adicionado à fase aquosa, RNAs grandes (incluindo 28S rRNA, 18S rRNA e mRNA) são imobilizados enquanto RNAs pequenos (≤ 200 nt, como miRNA, siRNA, shRNA, snRNA, etc.) fluxo através do qual é passado através de uma coluna de spin de miRNA onde os miRNAs ficam imobilizados após a adição de mais etanol.