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Proteinase K (Powder), 100Mg

Proteinase K (Powder), 100Mg

R$665,50

Atividade específica: 40 U/mg de proteína
Contém 100 mg de proteinase K, pó liofilizado.

Características
Ativo em uma ampla gama de produtos de reação

Descrição
Proteinase K é uma protease endolítica que cliva ligações peptídicas nos lados carboxílicos de aminoácidos alifáticos, aromáticos ou hidrofóbicos.
A Proteinase K é classificada como uma serina protease. O menor peptídeo a ser hidrolisado por essa enzima é um tetrapeptídeo.

Aplicações
Isolamento de DNA genômico de células e tecidos cultivados;
Remoção de DNases e RNases ao isolar DNA e RNA de tecidos ou linhas celulares;
Melhora a eficiência de clonagem de produtos de PCR.

Inibição e Inativação
Inibidores: a proteinase K não é inativada por quelantes de metal, por reagentes reativos com tiol ou por inibidores específicos de tripsina e quimiotripsina. O fluoreto de fenilmetilsulfonil e o diisopropil fosforofluoridato inibem completamente a enzima.
Inativado por aquecimento a 95 °C por 10 minutos.

 

Observação

  • Atividade ótima em 50-55 ° C.
  • A desnaturação rápida da enzima ocorre em temperaturas acima de 65 ° C.
  • A concentração de trabalho recomendada para Proteinase K é de 0,05-1 mg /ml. A atividade da enzima é estimulada por SDS 0,2-1% ou por uréia 1-4 M.
  • O Ca2 + protege a Proteinase K contra a autólise, aumenta a estabilidade térmica e tem uma função reguladora para o local de ligação do substrato da Proteinase K.
  • Estável em uma ampla faixa de pH: 4,0-12,5, pH ideal 7,5-8,0.

Disponível por encomenda

SKU: N9016 Categoria: Tag:
Peso molecular
Monômero de 28,9 kDa (6).
Tampão de diluição
Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), contendo cloreto de cálcio 5 mM e glicerol a 50% (v/v).
Armazenamento
Para armazenamento  prolongado, armazene o pó de Proteinase K a 4ºC e o Tampão de Deluição a -20 ℃ separadamente.
Para uso, a solução dissolvida deve ser armazenada a -20ºC.
Controle de qualidade
Atividade de DNase: Nenhuma atividade enzimática detectável com λ DNA após 6 horas incubação a 37ºC.
Atividade de RNase: Nenhuma atividade de ribonuclease detectável após 16 horas de incubação a 25ºC.

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    Descrição

    O marcador 50 pb é ideal para determinar o tamanho do DNA de fita dupla de 50 a 500 pares de bases. A escada consiste em 8 fragmentos lineares de fita dupla. O fragmento de 250 pb está presente em intensidade aumentada para permitir fácil identificação. Todos os fragmentos são quantificados com precisão e misturados durante a produção.

    Para carregamento de 5 ul, todos os fragmentos, exceto 250bp, são de 40 ng. O fragmento de 250 pb é de 100 ng.

    O marcador é pré-misturado com corante e está pronto para uso.

    Carregamento recomendado

    2-5 ul

    Concentração

    Banda em evidência 100 ng / 5 ul
    Outras bandas 40 ng / 5 ul

    Condição de eletroforese recomendada
    8 cm, Gel de agarose a 3%, 0,5 × TBE, 5 V/cm

    Conteúdo (bp)

    50, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500

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    O fragmento de 2.000 pb está presente em intensidade aumentada para permitir fácil identificação. Todos os fragmentos são quantificados com precisão e misturados durante a produção. Para carregamento de 5 ul, todos os fragmentos, exceto 2.000 bp, são de 40 ng. O fragmento de 2.000 bp é 100 ng. Este marcador é pré-misturada com tampão de carregamento azul e está pronto para uso.

    Carregamento recomendado
    2-5 ul /poço

    Concentração
    Bandas em evidência 100 ng /5ul
    Outras bandas 40 ng /5ul

    Condição de eletroforese recomendada
    8 cm, Gel de Agarose a 1%, 1 × TAE, 7 V / cm, 45min.

    Conteúdo （bp）

    500, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000.

    Concentração

    92 ng /ul

     

    Armazenar

    Estável por 3 meses em temperatura ambiente, para armazenamento de longo prazo, armazene a -20 ℃.

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    A Proteinase K é classificada como uma serina protease. O menor peptídeo a ser hidrolisado por essa enzima é um tetrapeptídeo.

    Aplicações

    • Isolamento de DNA genômico de células e tecidos cultivados;
    • Remoção de DNases e RNases ao isolar DNA e RNA de tecidos celulares;
    • Melhorar a eficiência de clonagem de produtos de PCR.

    Concentração
    20 mg /ml

    Buffer de Armazenamento
    A enzima é fornecida em: Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), contendo cloreto de cálcio 5 mM e glicerol a 50% (v/v).

    Inibição e Inativação
    Inibidores: a proteinase K não é inativada por quelantes de metal, por reagentes reativos com tiol ou por inibidores específicos de tripsina e quimiotripsina. O fluoreto de fenilmetilsulfonil e o diisopropil fosforofluoridato inibem completamente a enzima.
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