Proteinase K (Powder), 100Mg
R$665,50
Atividade específica: 40 U/mg de proteína
Contém 100 mg de proteinase K, pó liofilizado.
Características
Ativo em uma ampla gama de produtos de reação
Descrição
Proteinase K é uma protease endolítica que cliva ligações peptídicas nos lados carboxílicos de aminoácidos alifáticos, aromáticos ou hidrofóbicos.
A Proteinase K é classificada como uma serina protease. O menor peptídeo a ser hidrolisado por essa enzima é um tetrapeptídeo.
Aplicações
Isolamento de DNA genômico de células e tecidos cultivados;
Remoção de DNases e RNases ao isolar DNA e RNA de tecidos ou linhas celulares;
Melhora a eficiência de clonagem de produtos de PCR.
Inibição e Inativação
Inibidores: a proteinase K não é inativada por quelantes de metal, por reagentes reativos com tiol ou por inibidores específicos de tripsina e quimiotripsina. O fluoreto de fenilmetilsulfonil e o diisopropil fosforofluoridato inibem completamente a enzima.
Inativado por aquecimento a 95 °C por 10 minutos.
Observação
- Atividade ótima em 50-55 ° C.
- A desnaturação rápida da enzima ocorre em temperaturas acima de 65 ° C.
- A concentração de trabalho recomendada para Proteinase K é de 0,05-1 mg /ml. A atividade da enzima é estimulada por SDS 0,2-1% ou por uréia 1-4 M.
- O Ca2 + protege a Proteinase K contra a autólise, aumenta a estabilidade térmica e tem uma função reguladora para o local de ligação do substrato da Proteinase K.
- Estável em uma ampla faixa de pH: 4,0-12,5, pH ideal 7,5-8,0.
Disponível por encomenda
| Peso molecular Monômero de 28,9 kDa (6). |
| Tampão de diluição Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), contendo cloreto de cálcio 5 mM e glicerol a 50% (v/v). |
| Armazenamento Para armazenamento prolongado, armazene o pó de Proteinase K a 4ºC e o Tampão de Deluição a -20 ℃ separadamente. Para uso, a solução dissolvida deve ser armazenada a -20ºC. |
| Controle de qualidade Atividade de DNase: Nenhuma atividade enzimática detectável com λ DNA após 6 horas incubação a 37ºC. Atividade de RNase: Nenhuma atividade de ribonuclease detectável após 16 horas de incubação a 25ºC. |
