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Proteinase K (Powder), 100Mg

Proteinase K (Powder), 100Mg

R$665,50

Atividade específica: 40 U/mg de proteína
Contém 100 mg de proteinase K, pó liofilizado.

Características
Ativo em uma ampla gama de produtos de reação

Descrição
Proteinase K é uma protease endolítica que cliva ligações peptídicas nos lados carboxílicos de aminoácidos alifáticos, aromáticos ou hidrofóbicos.
A Proteinase K é classificada como uma serina protease. O menor peptídeo a ser hidrolisado por essa enzima é um tetrapeptídeo.

Aplicações
Isolamento de DNA genômico de células e tecidos cultivados;
Remoção de DNases e RNases ao isolar DNA e RNA de tecidos ou linhas celulares;
Melhora a eficiência de clonagem de produtos de PCR.

Inibição e Inativação
Inibidores: a proteinase K não é inativada por quelantes de metal, por reagentes reativos com tiol ou por inibidores específicos de tripsina e quimiotripsina. O fluoreto de fenilmetilsulfonil e o diisopropil fosforofluoridato inibem completamente a enzima.
Inativado por aquecimento a 95 °C por 10 minutos.

 

Observação

  • Atividade ótima em 50-55 ° C.
  • A desnaturação rápida da enzima ocorre em temperaturas acima de 65 ° C.
  • A concentração de trabalho recomendada para Proteinase K é de 0,05-1 mg /ml. A atividade da enzima é estimulada por SDS 0,2-1% ou por uréia 1-4 M.
  • O Ca2 + protege a Proteinase K contra a autólise, aumenta a estabilidade térmica e tem uma função reguladora para o local de ligação do substrato da Proteinase K.
  • Estável em uma ampla faixa de pH: 4,0-12,5, pH ideal 7,5-8,0.

Disponível por encomenda

SKU: N9016 Categoria: Tag:
Peso molecular
Monômero de 28,9 kDa (6).
Tampão de diluição
Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), contendo cloreto de cálcio 5 mM e glicerol a 50% (v/v).
Armazenamento
Para armazenamento  prolongado, armazene o pó de Proteinase K a 4ºC e o Tampão de Deluição a -20 ℃ separadamente.
Para uso, a solução dissolvida deve ser armazenada a -20ºC.
Controle de qualidade
Atividade de DNase: Nenhuma atividade enzimática detectável com λ DNA após 6 horas incubação a 37ºC.
Atividade de RNase: Nenhuma atividade de ribonuclease detectável após 16 horas de incubação a 25ºC.

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    1kb DNA ladder plus
    M1191 (50ug)

    Concentração: 144ng/ul
    Armazenar a -20°C
    Volume estimado: 500ul

    Descrição
    1kb DNA ladder plus é ideal para determinar o tamanho de fitas duplas de DNA de 100 a 10.000 pares de base. O marcador consiste em 15 fragmentos de dupla fita. Os fragmentos de tamanho 500 e 3.000bp estão presentes com maior intensidade para permitir fácil identificação. Todos os fragmentos são precisamente quantificados e misturados durante a fabricação. Para carregamento de 5ul todos os fragmentos têm 40ng, com exceção dos fragmentos 500 e 3.000bp que têm 100ng. Este marcador é pré-misturado com tampão de carregamento azul e está pronto para uso.

    Carregamento recomendado
    2-5 ul por poço

    Concentração
    Bandas em evidência 100 ng/5ul
    Outras bandas 40 ng/5ul

    Condições recomendadas para Eletroforese
    Gel de agarose 1%, 8cm, 1X TAE, 7 V/cm, 45 min.

    Conteúdo (bp)
    100, 200, 300, 400, 500, 700, 1.000, 1.500, 2.000, 3.000, 4.000, 5.000, 6.000, 8.000 e 10.000

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    Embalagem: 500 ul
    Concentração: 20.000x

    O DSView é uma alternativa ao tradicional corante de brometo de etídio (EB) para detecção de ácido nucléico em géis de agarose. Emite fluorescência verde quando ligado ao DNA ou RNA. O corante DSView tem dois máximos de excitação de fluorescência: em 267 nm e outro em 294 nm. Além disso, também tem uma excitação visível a 491nm.

    Armazenamento: guarde a 4ºC por até 2 anos.

    Protocolo

    1. Preparar 100 ml de solução de gel de agarose (concentração de 0,8 a 2%) e misturar completamente. Coloque o frasco no microondas, aqueça até que a solução esteja completamente limpa e não haja partículas flutuantes pequenas visíveis (cerca de 2 ~ 3 minutos).

    2. Adicione 2-5μl de DSViewTM à solução de gel. Agite o frasco suavemente para misturar a solução e evite formar bolhas.

    3. Enquanto a solução de gel esfria, despeje-a na bandeja de gel até que os dentes do pente estejam imersos cerca de 1/4 ~ 1/2 na solução de gel.

    4. Permitir o gel de agarose esfriar até solidificado. Coloque amostras no gel e corra a eletroforese.

    5.Detectar as bandas sob iluminação UV.

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    Aplicações

    • Isolamento de DNA genômico de células e tecidos cultivados;
    • Remoção de DNases e RNases ao isolar DNA e RNA de tecidos celulares;
    • Melhorar a eficiência de clonagem de produtos de PCR.

    Concentração
    20 mg /ml

    Buffer de Armazenamento
    A enzima é fornecida em: Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), contendo cloreto de cálcio 5 mM e glicerol a 50% (v/v).

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    • O Ca2 + protege a Proteinase K contra a autólise, aumenta a estabilidade térmica e tem uma função reguladora para o local de ligação do substrato da Proteinase K.
    • Estável em uma ampla faixa de pH: 4,0-12,5, pH ideal 7,5-8,0
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