RNase A (Lyophilized Powder), 100mg

PROTOCOLO

RNase A

N9046 (100MG)

Atividade específica: >2.500 u/mg proteínas (>units/mg proteínas)
Formato: contém 100mg de RNase A liofilizada.

Armazenar em temperatura ambiente por até um ano. Para um período maior armazenar em 4°C.

Descrição
RNase A, livre de DNase e proteases é uma endoribonuclase que degraga especificamente fitas únicas de RNA, clivando as ligações de fosfodiéster entre 5’ ribose do nucleotídeo e o grupo fosfato anexado a 3’ ribose de um nucleotídeo de pirimidina adjacente. O 2′, 3′-fosfato cíclico resultante é hidrolisado ao 3′ nucleosídeo fosfato correspondente.

Aplicações
Preparação de DNA genomico e plasmídeos
Remoção do RNA a partir de amostras de proteína recombinante
Ensaios de proteção à ribonuclease
Mapeamento de mutações de uma única base de DNA ou RNA

Controle de Qualidade
A ausência de endodesoxirribonucleases, exodeoxiribonucleases e proteases foi confirmada por testes de qualidade adequados. Funcionalmente testadas para a digestão de RNA em um procedimento de purificação de DNA plasmidial.

Fonte
Pâncreas bovino.

Peso Molecular
13,7 kDa monómero.

Definição de Atividade por Unidade
Uma unidade da enzima provoca um aumento na absorbância de 1,0 a 260nm quando RNA de levedura é hidrolisado a 37°C e pH 5.0

Cinquenta unidades equivalem a aproximadamente equivalente a 1 unidade de Kunitz

Inibição e Inativação
Inibidores: O inibidor mais potente é uma proteína de ~50 kDa a partir de citosol de células de mamíferos, por exemplo, RiboLock™ RNase inibidor.

Outros inibidores: uridina 2′, 3′ vanadato cíclico, 5′-difosfoadenosina 3′-fosfato e 5′-difosfoadenosina 2′-fosfato (2), SDS, dietil pirocarbonato, guanidínio tiocianato 4M mais 0,1 M de 2-mercaptoetanol e íons de metais pesados. Inativado por extração com fenol / clorofórmio.

Inativado por extração com fenol/clorofórmio.

Inativado por aquecimento a 95°C durante 10 minutos.