Nota A concentração ótima para RNase A é de 1-100 ug/ml, dependendo da aplicação. |
A enzima é ativa sob uma grande variedade de condições de reação. Em baixas concentrações de sal (NaCl 0 a 100 mM), a RNase A cliva o RNA de cadeia simples e de cadeia dupla, bem como a cadeia de RNA em híbridos de RNA-DNA. No entanto, em concentrações de NaCl de 0.3M ou superior, a RNase A cliva especificamente o RNA de cadeia simples. |
RNase A (Lyophilized Powder), 100mg
R$319,44
RNase A
N9046 (100MG)
Atividade específica: >2.500 u/mg proteínas (>units/mg proteínas)
Formato: contém 100mg de RNase A liofilizada.
Armazenar em temperatura ambiente por até um ano. Para um período maior armazenar em 4°C.
Descrição
RNase A, livre de DNase e proteases é uma endoribonuclase que degraga especificamente fitas únicas de RNA, clivando as ligações de fosfodiéster entre 5’ ribose do nucleotídeo e o grupo fosfato anexado a 3’ ribose de um nucleotídeo de pirimidina adjacente. O 2′, 3′-fosfato cíclico resultante é hidrolisado ao 3′ nucleosídeo fosfato correspondente.
Aplicações
Preparação de DNA genomico e plasmídeos
Remoção do RNA a partir de amostras de proteína recombinante
Ensaios de proteção à ribonuclease
Mapeamento de mutações de uma única base de DNA ou RNA
Controle de Qualidade
A ausência de endodesoxirribonucleases, exodeoxiribonucleases e proteases foi confirmada por testes de qualidade adequados. Funcionalmente testadas para a digestão de RNA em um procedimento de purificação de DNA plasmidial.
Fonte
Pâncreas bovino.
Peso Molecular
13,7 kDa monómero.
Definição de Atividade por Unidade
Uma unidade da enzima provoca um aumento na absorbância de 1,0 a 260nm quando RNA de levedura é hidrolisado a 37°C e pH 5.0
Cinquenta unidades equivalem a aproximadamente equivalente a 1 unidade de Kunitz
Inibição e Inativação
Inibidores: O inibidor mais potente é uma proteína de ~50 kDa a partir de citosol de células de mamíferos, por exemplo, RiboLock™ RNase inibidor.
Outros inibidores: uridina 2′, 3′ vanadato cíclico, 5′-difosfoadenosina 3′-fosfato e 5′-difosfoadenosina 2′-fosfato (2), SDS, dietil pirocarbonato, guanidínio tiocianato 4M mais 0,1 M de 2-mercaptoetanol e íons de metais pesados. Inativado por extração com fenol / clorofórmio.
Inativado por extração com fenol/clorofórmio.
Inativado por aquecimento a 95°C durante 10 minutos.
Disponível por encomenda
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Características
Livre de endodeoxirribonucleases, exodeoxirribonucleases, ribonucleases e fosfatases.Descrição
A água tratada com DEPC é desionizada, tratada com dietilpirocarbonato (DEPC) e filtrada por membrana de 0,22 um. É recomendado para ser usado em qualquer aplicação onde RNA esteja envolvido.Controle de qualidade
A ausência de endodeoxirribonucleases, exodeoxirribonucleases, ribonucleases e fosfatases é confirmada por testes de qualidade apropriados.
Testado em transcrição in vitro.Observação
A água tratada com DEPC não é recomendada para PCR ou experimentos in vivo.Armazenamento
Armazenar a -20 ° C. -
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Descrição
dATP (2′-desoxiadenosina 5′-trifosfato) é fornecido como uma solução aquosa 100 mM a pH 7,0.Aplicações
Para uso em PCR, PCR longo, RT-PCR, síntese de cDNA, extensão de primer, sequenciamento de DNA, marcação de DNA. -
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Descrição
A digestão de Hind III de DNA lambda produz 8 fragmentos adequados para uso como
padrões de peso molecular para eletroforese em gel de agarose. DNA / Hind Ⅲ é pré-misturado com tampão de carregamento e está pronto para uso.Condição de eletroforese recomendada
8 cm, gel de agarose 0,7%, 1 × TAE, 7 V / cm, 45 min.Conteúdos (bp)
125, 564, 2.027, 2,322, 4,361, 6,557, 9,416, 23,130.Armazenar
Estável por 3 meses em temperatura ambiente, para armazenamento a longo prazo, armazene a -20 ℃.Atenção!
As extremidades coesivas dos fragmentos 1 e 4 podem causar a formação de banda extra de 27491 bp. Os fragmentos podem ser separados por aquecimento a 65 ° C por 3 minutos antes de carregar a amostra no gel.
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Descrição
Proteinase K pronta pra usar é uma protease endolítica que cliva ligações peptídicas nos lados carboxílicos de aminoácidos alifáticos, aromáticos ou hidrofóbicos.
A Proteinase K é classificada como uma serina protease. O menor peptídeo a ser hidrolisado por essa enzima é um tetrapeptídeo.Aplicações
- Isolamento de DNA genômico de células e tecidos cultivados;
- Remoção de DNases e RNases ao isolar DNA e RNA de tecidos celulares;
- Melhorar a eficiência de clonagem de produtos de PCR.
Concentração
20 mg /mlBuffer de Armazenamento
A enzima é fornecida em: Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), contendo cloreto de cálcio 5 mM e glicerol a 50% (v/v).Inibição e Inativação
Inibidores: a proteinase K não é inativada por quelantes de metal, por reagentes reativos com tiol ou por inibidores específicos de tripsina e quimiotripsina. O fluoreto de fenilmetilsulfonil e o diisopropil fosforofluoridato inibem completamente a enzima.
Inativado por aquecimento a 95 °C por 10 minutos.Observação
- Atividade ótima em 50-55 ° C.
- A desnaturação rápida da enzima ocorre em temperaturas acima de 65 ° C.
- A concentração de trabalho recomendada para Proteinase K é de 0,05-1 mg /ml. A atividade da enzima é estimulada por SDS 0,2-1% ou por uréia 1-4 M.
- O Ca2 + protege a Proteinase K contra a autólise, aumenta a estabilidade térmica e tem uma função reguladora para o local de ligação do substrato da Proteinase K.
- Estável em uma ampla faixa de pH: 4,0-12,5, pH ideal 7,5-8,0