Rprotein A Sepharose Ff- 5 ml
rProtein A Sepharose 4 Fast Flow é uma resina de afinidade para purificação de anticorpos em escala laboratorial e de processo.
- Para purificação de anticorpos monoclonais e policlonais em escala laboratorial e de processo.
- Bem estabelecido entre as resinas de Proteína A como excelente para processos de anticorpos monoclonais (mAb).
- Livre de componentes derivados de animais.
- A matriz de base hidrofílica garante baixos níveis de ligação não específica e baixos níveis de impurezas derivadas da célula hospedeira no pool de eluição.
- Atende às demandas industriais de segurança de fornecimento, desempenho robusto e suporte regulatório.
Purificação de anticorpos monoclonais e policlonais
rProtein A Sepharose 4 Fast Flow é construído sobre a plataforma Sepharose Fast Flow bem estabelecida e é usado em muitos processos de anticorpos monoclonais aprovados. É composto de proteína A recombinante acoplada à matriz de base de agarose 4% reticulada. A resina de agarose altamente reticulada permite altas taxas de fluxo e alta produtividade.
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| Parâmetro | rProteína A Sepharose Fast Flow |
|---|---|
| Técnica de cromatografia | Cromatografia de afinidade de anticorpos |
| Resina BioProcess | Sim |
| Certificado de análise | Sim |
| Estabilidade química | Estável em tampões aquosos comumente usados em cromatografia de proteína A, 8 M de ureia, 6 M de gua-HCl, 2% de álcool benzílico, 10 mM de NaOH (pH 11), 0,1 M de citrato de sódio/HCl (pH 3), 20% de etanol |
| Capacidade de ligação dinâmica, Q B10 1 | ~35 mg de resina hIgG/mL |
| Ligando | Proteína A recombinante (E. coli) |
| Método de Acoplamento de Ligando | Ativação de epóxi |
| Densidade do ligante | 6 mg de rProteína A/ml de meio |
| Matriz | Agarose reticulada, 4%, esférica |
| Tamanho da partícula | 60 µm-165 µm |
| Tamanho da partícula, d 50V 2 | ~90 µm |
| Características de pressão/fluxo 3 | 150-250 cm/h a <0,1MPa em uma coluna XK 50/60 com 5 cm de diâmetro e 25 cm de altura do leito (a 20°C usando tampões com a mesma viscosidade da água) |
| Armazenar | 2 a 8°C, 20% Etanol |
| Capacidade total de ligação 4 | ~50 mg de resina hIgG/mL |
| Estabilidade de pH, CIP 5 | 3–12 |
| Estabilidade de pH, operacional 6 | 3–10 |
| Tamanho do pacote | 5ml |
- 1 Capacidade de ligação dinâmica a 10% de avanço por análise frontal a uma velocidade de fase móvel de 100 cm/h em uma coluna PEEK 7,5/50 a 5 cm de altura do leito (3 min de tempo de residência) para IgG humana em NaH₂PO₄ 0,020 M, pH 7,0
- 2 Tamanho de partícula mediano da distribuição de volume cumulativo.
- 3 As características de pressão/fluxo descrevem a relação entre pressão e fluxo nas circunstâncias definidas. A pressão indicada não deve ser considerada como a pressão máxima da resina. Teste de pressão/fluxo realizado na matriz base.
- 4 IgG humano em excesso é carregado em NaH2PO4 0,020 M a pH 7,0 em uma coluna PEEK 7,5/50. A capacidade de ligação é obtida medindo a quantidade de IgG humana eluída em glicina 0,1 M a pH 3,0.
- 5 pH abaixo de 3 às vezes é necessário para eluir espécies de IgG fortemente ligadas. No entanto, os ligantes de proteína podem hidrolisar em pH abaixo de 2. Faixa de pH onde a resina pode ser submetida a limpeza no local sem alteração significativa na função Agente redutor, por exemplo, 1-tioglicerol 100 mM seguido por NaOH 15 mM está entre os CIP mais eficientes para rProteína Um fluxo rápido de sepharose”
- 6 faixa de pH onde a resina pode ser operada sem mudança significativa na função
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