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Sialic Acid Fluorescence Labeling Kit – 100 Rxns

R$16.157,50

A marcação por fluorescência do ácido siálico com 1,2-diamino-4,5-metilenooxibenzeno (DMB) é um método analítico simples e muito sensível no qual os ácidos siálicos livres são analisados ​​por HPLC de fase reversa após marcação com DMB. Os ácidos siálicos que estão ligados às cadeias de açúcar em glicoproteínas ou glicolipídios também podem ser medidos após pré-tratamento com sialidases ou hidrólise ácida. O limite de detecção do ácido DMB-siálico é de 57 fmol. O kit de rotulagem de fluorescência de ácido siálico da TaKaRa foi projetado para simplificar o procedimento de derivatização de DMB. Os reagentes são fornecidos em soluções aquosas e o protocolo envolve apenas a mistura de reagentes e incubação. Pela combinação deste método DMB com derivatização de Piridilamino (PA), os sialoglicoconjugados podem ser analisados ​​com sensibilidade extremamente alta.

Disponível por encomenda

SKU: 4400 Categoria:

Mais Informações

Formulários

  • Análise quantitativa e altamente sensível de sialoglicoconjugados
  • HPLC de ácido siálico

Componentes

Solução DMB 2x1ml
Solução de Acoplamento* 2x5ml
Neu5Ac (100 µl) 500 µl

* Contém 2-mercaptoetanol, hidrossulfito de sódio e ácido acético

Protocolo

  1. Coloque as amostras contendo ácidos siálicos livres (5 pmol–5 nmol) em tubos de 1,5 ml com tampa de rosca.
    NOTA:O volume da amostra deve ser mantido abaixo de 50 µl. Como as condições ácidas são necessárias para a reação a seguir, o pH deve ser neutro ou ácido.
  2. Preparar uma solução mista com uma proporção de Reagente 1:Reagente 2:H 2O de 1:5:4. Adicione 200 µl da solução mista às amostras. Misture os tubos e deixe as reações prosseguirem por 2,5 horas a 50°C, protegidos da luz.
    NOTA: A solução mista é estável por pelo menos uma semana a 4°C.
  3. Resfrie os tubos no gelo para terminar as reações.
  4. Injete 10 µl de cada mistura de reação em uma coluna de HPLC. A quantidade de ácido siálico na amostra pode ser calculada a partir de uma curva de calibração com base na altura do pico obtida com o padrão de ácido siálico definido.

Armazenar

Armazenar a –20°C. Proteja a solução DMB da luz.

Citações de produtos

Hara, S. et al.,  Determinação de ácidos N-acetilneuramínicos mono-O-acetilados em soros humanos e de ratos por cromatografia líquida de alta eficiência fluorométrica. Anal. Bioquímica . 179, 162-166 (1989).

Klein, A. et al.,  Novos ácidos siálicos de fontes biológicas identificados por uma abordagem abrangente e sensível: espectrometria de massa de cromatografia líquida-electrospray ionização (LC-ESI-MS) de quinoxalinonas SIA. Glycobiology 7, 421-432 (1997).

Nakamura, M. et ai. , 1,2-Diamino-4,5-metilenodioxibenzeno como reagente fluorogénico altamente sensível para ácidos a-ceto. Química Farmácia. Touro. 35, 687-692 (1987).

Informações adicionais do produto

Consulte o Certificado de Análise do produto para obter informações sobre as condições de armazenamento, componentes do produto e especificações técnicas. Consulte a Lista de componentes do kit para determinar os componentes do kit. Os Certificados de Análise e as Listas de Componentes do Kit estão localizados na guia Documentos.

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