SMART-Seq Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian) User Manual
SMART-Seq® Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR® Mammalian) 24 Rxns
R$29.273,13
SMART-Seq Total RNA Pico Input com UMIs (ZapR Mammalian) gera bibliotecas de RNA-seq específicas de fita para sequenciamento Illumina a partir de entradas de 250 pg–10 ng de RNA total purificado ou de 10–1.000 células intactas. O design da biblioteca apresentado neste kit adiciona um identificador molecular exclusivo (UMI) de 8 nucleotídeos (nt) por meio da etapa de transcrição reversa para mitigar o potencial viés de PCR, bem como fornecer informações adicionais para quantificação de transcrição. Material suficiente é fornecido com este kit para realizar até 24 reações.
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O SapphireAmp Fast PCR Master Mix foi projetado para PCR rápido e simplificado e, portanto, é ideal para aplicações como PCR de colônia. Ele contém uma enzima PCR hotstart, tampão otimizado, dNTPs, juntamente com um corante de carregamento de gel azul e reagente de densidade, em um formato conveniente de pré-mistura 2X.
As reações são montadas simplesmente misturando primers e molde de DNA com SapphireAmp Fast PCR Master Mix. Para uma triagem rápida e conveniente, as reações de amplificação podem ser carregadas diretamente em um gel de agarose imediatamente após a amplificação sem purificação ou digeridas diretamente com enzimas de restrição.
Para PCR de colônias baseadas em E. coli , inserções de até ~5 kb de comprimento são facilmente rastreadas; A PCR da colônia pode ser realizada em cerca de uma hora.
Para DNA genômico humano, a amplificação de alvos de 2 kb pode ser completada em uma hora; amplificações de até 6 kb são possíveis.
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O kit SMARTer RACE 5’/3′ permite a síntese de cDNA de primeira fita a partir de poli A+ ou RNA total via tecnologia SMART ( S witching Mechanism A t 5′ End of R NA T emplate ) e facilita o desempenho de 5′ – e 3′-RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) PCR com o Universal Primer Mix do kit. Nosso SMARTer Oligo cuidadosamente projetado e especialmente modificado captura preferencialmente as extremidades 5′ do cDNA durante a síntese de cDNA. Usando este SMARTer Oligo, nosso procedimento enriquece os pools de cDNA para sequências 5′, aumentando assim a probabilidade de você amplificar toda a sequência do seu gene.
Os produtos RACE PCR são amplificados com a SeqAmp DNA Polimerase fornecida e clonados no vetor linearizado pRACE com In-Fusion HD Cloning. O kit SMARTer RACE 5’/3′ foi aprimorado para acomodar volumes maiores de entrada de RNA e ter melhor desempenho em alvos desafiadores do que o kit de amplificação de cDNA SMARTer RACE original. O In-Fusion HD Cloning Kit, NucleoSpin Gel e PCR Clean-Up Kit e Stellar Competent Cells estão incluídos para sua conveniência na clonagem de produtos RACE. Os primers RACE específicos do gene são fornecidos pelo usuário.