Superdex 200 Increase 10/300 GL
Superdex 200 Aumentar colunas de cromatografia de exclusão de tamanho em pequena escala
As colunas Superdex 200 Increase SEC são para purificação e análise de alta resolução e pequena escala de mAbs e outras proteínas com Mr~ 10.000 a ~ 600.000.
- Desempenho aprimorado – resolução e tempo de execução aprimorados em comparação com o antecessor Superdex 200.
- Resolução muito alta – o tamanho pequeno do grânulo e a distribuição estreita do tamanho das partículas fornecem alta resolução, para alta pureza da proteína.
- Alta taxa de fluxo – devido aos grânulos rígidos que proporcionam excelentes propriedades de pressão/fluxo.
Nova geração de colunas de cromatografia de exclusão de tamanho
O Superdex 200 Increase faz parte da nova geração de colunas SEC baseadas em agarose da GE chamada “Increase”, que oferece purificação de maior resolução em tempos de execução mais curtos em comparação com seus antecessores.
Colunas SEC para análise e purificação de anticorpos
O Superdex 200 Increase é adequado tanto para fins preparativos como analíticos.
A faixa de fracionamento do Superdex 200 Increase permite a separação de uma grande variedade de proteínas (Mr ~ 10.000 a ~ 600.000) com uma resolução otimizada para anticorpos (Mr ~ 100.000 a ~ 300.000). É bem adequado para detecção e separação de dímero, monômero e agregado de anticorpo em preparações de mAb.
Essas colunas também permitem a caracterização de proteínas, incluindo análise agregada de anticorpos, análise de homogeneidade de tamanho de proteínas de membrana e interações proteína-proteína, onde dados de alta qualidade podem ser obtidos.
Recursos de limpeza no local (CIP)
Esta resina à base de agarose é resistente a álcalis e suporta procedimentos de limpeza no local (CIP). Esse recurso permite que a mesma coluna seja usada para proteínas diferentes, com risco mínimo de transferência entre amostras.
A limpeza regular também pode aumentar a vida útil da coluna.
Três tamanhos de coluna SEC
Três tamanhos de coluna de cromatografia de exclusão de tamanho (SEC) são projetados para atender a diferentes propósitos:
- Coluna 10/300 GL, 10 mm × 300 mm, para análise de alta resolução, bem como para purificação preparativa em pequena escala (25–500 uL), como a etapa de polimento em um protocolo de purificação
- Coluna 5/150, 5 mm × 150 mm, para verificação rápida de pureza e triagem de pequenos volumes (4–50 uL)
- Coluna 3,2/300, 3,2 mm × 300 mm, para análise de alta resolução e purificação de volumes de amostra de 4–50 ul, quando a quantidade de amostra é limitada e o baixo consumo de tampão é importante.
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| Parâmetro | Superdex 200 Aumento 10/300 GL |
|---|---|
| Dimensões da cama | 10 x 300 mm |
| Altura da cama | 300 to 310 mm |
| Suporte de cama | Filtro |
| Volume da cama | ~ 24 mL |
| Estabilidade química | Condições em que a resina pode ser operada sem alteração significativa na função: • Todos os tampões aquosos comumente usados, pH 3 a 12 • Ureia, até 8 M • Detergentes iônicos e não iônicos • Cloridrato de Guanidina, até 6 M Condições em que a resina pode ser submetida a limpeza ou sanitização no local sem alteração significativa na função: • Acetonitrila, até 30% • Hidróxido de sódio, até 1 M • Etanol, até 70% • Metanol, até 100% • Ácido acético, até 1 M • Isopropanol, até 30% • Ácido clorídrico, até 0,1 M • Ácido trifluoroacético, até 10% • Ácido fórmico, até 70% Evitar: • Agentes oxidantes • Soluções não filtradas |
| Estabilidade química (hardware de coluna) | Resistente à maioria das soluções usadas em cromatografia líquida, exceto hidrocarbonetos, solventes aromáticos e hidrocarbonetos clorados |
| Coluna i.d. | 10 mm |
| Limite de exclusão (Mr) (proteínas globulares) | ~ 1.3 × 106 |
| Faixa de fracionamento (Mr) (proteínas globulares) | 10 000 to 600 000 |
| Material (hardware de coluna) | Vidro de borossilicato, polieteretercetona (PEEK), polipropileno (PP), monômero de etileno propileno dieno (EPDM) e perfluoro-borracha (PFR) |
| Material (suporte de cama) | Filtro de polietileno (PE) |
| Material (tubo de coluna) | Vidro de borossilicato |
| Matriz | Composto de agarose reticulada e dextrano |
| Caudal de funcionamento, máx. | 1,80 mL/min, água à temperatura ambiente; 0,90 mL/min, etanol a 20% ou glicerol a 10% à temperatura ambiente; 0,90 mL/min de água a baixa temperatura; 0,45 mL/min 20% de etanol ou 10% de glicerol em baixa temperatura |
| Taxa de fluxo operacional, recomendada | 0.75 mL/min |
| Tamanho da partícula, d50V | ~ 8.6 um |
| Volume da amostra | 25 to 500 uL |
| Condições de armazenamento | 4˚C a 30˚C, 20% de etanol |
| Placas teóricas | > 48 000 m-1 |
| Queda de pressão típica sobre o leito empacotado | ~ 3 MPa |
| Estabilidade de pH, limpeza no local (CIP) | 1 to 14 |
| Estabilidade de pH, operacional | 3 to 12 |
