| Parâmetro | Thrombin |
|---|---|
| Aplicação | Usado para separação específica do local do marcador GST de proteínas expressas usando vetores pGEX-T |
| Tampão de Clivagem | PBS: NaCl 140 mM, KCl 2,7 mM, Na2HPO4 10 mM, KH2PO4 1,8 mM, pH 7,3 |
| Tampão de Eluição | 50 mM de Tris-HCl, 10 mM de glutationa reduzida, pH 8,0 |
| Inibidor | Pefabloc TH benzamidina, AEBSF, APMSF, antitrombina III, Antipain, α1-antitripsina, aprotinina, quimostatina, hirudina, leupeptina, PMSF |
| Peso Molecular (Mr) | 37000 |
| Fornecido como | Pó liofilizado |
| Definição da unidade | Uma unidade de enzima cliva >= 90% de 100 μg de uma proteína de fusão GST de teste quando incubada em 1 × PBS a 22 ° C por 16 h. |
| Vetor | pGEX-4T-1, pGEX-4T-2, pGEX-4T-3, pGEX-2TK |
| Tamanho do pacote | 500 unidades |
THROMBIN protease for affinity tag removal 500 units
A trombina é uma serina protease purificada de plasma bovino para digestão de proteínas marcadas com GST ou outras proteínas marcadas que contêm a sequência de reconhecimento da trombina.
- Clivagem específica – permite a clivagem específica do local de proteínas de fusão contendo uma sequência de reconhecimento acessível.
- Funcionalmente livre de outros fatores de coagulação, como plasminogênio e plasmina.
Trombina protease para clivagem de proteína de fusão
A trombina é usada para digerir proteínas de fusão preparadas a partir de vetores pGEX contendo a sequência de reconhecimento da trombina. Os seguintes vetores codificam essa sequência: pGEX-1λT, pGEX-2T, pGEX-2TK, pGEX-4T-1, pGEX-4T-2 e pGEX-4T-3.
A trombina protease da GE é “amigável às proteínas”, preservando a estrutura e a estabilidade da proteína durante toda a purificação para maximizar as amostras e os resultados. O produto também simplifica a metodologia, permitindo que os usuários detectem proteínas expressas por rotulagem direta de produtos de fusão in vitro.
Uso bem sucedido em pesquisas publicadas
A protease de trombina da Cytiva é usada para clivagem de GST em uma variedade de aplicações de pesquisa, incluindo:
- Dissociação de endos de grânulos durante o estudo de proteína fosfatase 2A na mitose
- Purificação de domínios transmembranares e citoplasmáticos de LR11 durante o estudo da proteína de ligação de APP humana LR11/SorLA para estudos de RMN
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- Volume de eluição flexível de 10 a 50 ul para diferentes necessidades de concentração de DNA.
- Projeto de coluna aprimorado com volume máximo aumentado, contendo até 800 ul de volume de líquido (950 ul sem tampa).
- O DNA altamente puro está pronto para uso direto em sequenciamento, PCR, marcação, digestão com enzimas de restrição e clonagem.
- A adição de um indicador visual de cor ao tampão de captura garante o pH ideal para máxima ligação e recuperação do DNA.
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