Component | KP172-01 (12 rxns) | ||
Box1 | ConA Magnetic Beads II | 60 μl | 240 μl |
CUT&Tag DNA Clean Beads | 2 ml | 4 ml × 2 | |
Box2 | ConA Beads Binding Buffer | 660 μl × 2 | 2.7 ml × 2 |
Cell Wash Buffer | 10 ml × 3 | 40 ml × 3 | |
Nuclear Extraction Buffer | 6 ml | 6 ml × 4 | |
1×Pro-Wash Buffer | 10 ml | 40 ml | |
pAG-Tn5 | 12 μl | 48 μl | |
Tagmentation Buffer | 600 μl | 2.4 ml | |
Protease Inhibitor | 420 μl | 840 μl × 2 | |
Ab Enhancer | 20 μl | 80 μl | |
Binding Enhancer | 80 μl | 320 μl | |
500 mM EDTA | 30 μl | 120 μl | |
Lysis Enhancer | 20 μl | 80 μl | |
Proteinase K(20 mg/ml) | 20 μl | 80 μl | |
2×CUT&Tag Library Amplification Mix | 300 μl | 600 μl × 2 | |
Nuclease-free Water | 1 ml | 4 ml |
TransNGS® CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina® (12 rxns)
R$8.820,60
O kit foi desenvolvido para preparar bibliotecas CUT&Tag para células de mamíferos para a plataforma de sequenciamento de alto rendimento Illumina. As bibliotecas preparadas podem ser usadas para sequenciamento de extremidade única e sequenciamento de extremidade pareada. A clivagem sob alvo e marcação (CUT&Tag) é um novo método para estudar interações de proteínas com DNA. A proteína de fusão A/G-Tn5 transposase e a proteína alvo podem formar um complexo imune por meio de pontes de anticorpos. A Tn5 transposase é ativada na presença de Mg2+, permitindo a inserção de sequências curtas contendo adaptadores em ambas as extremidades do fragmento de DNA que se liga à proteína-alvo. Por fim, a biblioteca pode ser construída por amplificação por PCR. O kit é adequado para pesquisas de DNA sobre a interação de proteínas de ligação ao DNA, como fatores de transcrição e co-reguladores. Comparado ao ChIP-seq tradicional, apresenta as vantagens de fornecer informações mais precisas e estáveis sobre a interação proteína-DNA com baixa entrada de células.
10-105 células de mamíferos, ou núcleos de células processadas, e células eucarióticas sem parede celular (como protoplastos de células vegetais, etc.).
A caixa 1 é armazenada a 2℃-8℃ por 1 ano e a caixa 2 é armazenada a -18℃ ou menos por 1 ano.
Gelo seco (-70℃)
Disponível por encomenda
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Detalhes do produto
FlyCut HindIII é expresso e purificado a partir de E. coli que carrega o gene HindIII recombinante. Seu peso molecular é de 35,8 kDa, com o local de reconhecimento em A ^ AGCTT. A reação é conduzida por 5-15 minutos a 37 ℃ e inativada pelo calor a 65 ℃ por 20 minutos. Esta enzima não é sensível à metilação dam, dcm ou CpG de mamíferos.
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FlyCut BglII é expresso e purificado a partir de E. coli que carrega o gene BglII recombinante. Seu peso molecular é de 26,7 kDa, com o local de reconhecimento em A ^ GATCT. A reação é conduzida por 5-15 minutos a 37 ℃ e inativada pelo calor a 80 ℃ por 20 minutos. Esta enzima não é sensível à metilação dam, dcm ou CpG de mamíferos.
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FlyCut XbaI é expresso e purificado a partir de E. coli que carrega o gene XbaI recombinante. Seu peso molecular é de 24,7 kDa, com o local de reconhecimento em T ^ CTAGA. A reação é conduzida por 5-15 minutos a 37oC e inativada por calor a 65oC por 20 minutos. Esta enzima não é sensível à metilação dcm ou CpG de mamíferos, mas é sensível à metilação dam.
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O kit Annexin V-FITC / PI Cell Apoptosis fornece um método rápido e sensível para a detecção precoce de apoptose. Em células normais, o fosfolipídio fosfatidilserina (PS) da membrana está localizado na superfície citoplasmática da membrana. Em células apoptóticas, o PS é translocado do folheto interno para o externo da membrana plasmática, expondo assim o PS ao ambiente celular externo. A anexina V conjugada com FITC, uma proteína de ligação a fosfolipídios dependente de Ca2 +, pode se ligar especificamente ao PS exposto. O iodeto de propídio (PI) é um corante de ligação ao ácido nucléico, que se liga fortemente aos ácidos nucléicos nas células e tinge as células com fluorescência vermelha. PI é imperceptível para células vivas e células apoptóticas precoces, então a combinação de Anexina V-FITC e coloração de PI permite a diferenciação entre diferentes estágios de células apoptóticas e células de necrose.