TransDetect® Single-Luciferase (Firefly) Reporter Assay Kit (50 rxns)

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  EasyScript First-Strand cDNA Synthesis SuperMix fornece todos os componentes necessários para a síntese de cDNA a partir do RNA total ou mRNA. O cDNA é eficientemente sintetizado pelo EasyScript RT/RI Enzyme Mix e 2 × ES Reaction Mix.

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  FlyCut XbaI é expresso e purificado a partir de E. coli que carrega o gene XbaI recombinante. Seu peso molecular é de 24,7 kDa, com o local de reconhecimento em T ^ CTAGA. A reação é conduzida por 5-15 minutos a 37oC e inativada por calor a 65oC por 20 minutos. Esta enzima não é sensível à metilação dcm ou CpG de mamíferos, mas é sensível à metilação dam.

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  FlyCut SpeI é expresso e purificado de E. coli que carrega o gene SpeI recombinante. Seu peso molecular é de 21,7 kDa, com o local de reconhecimento em A ^ CTAGT. A reação é conduzida por 5-15 minutos a 37 ℃ e inativada pelo calor a 80 ℃ por 20 minutos. Esta enzima não é sensível à metilação dam, dcm ou CpG de mamíferos.

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  O kit Annexin V-FITC / PI Cell Apoptosis fornece um método rápido e sensível para a detecção precoce de apoptose. Em células normais, o fosfolipídio fosfatidilserina (PS) da membrana está localizado na superfície citoplasmática da membrana. Em células apoptóticas, o PS é translocado do folheto interno para o externo da membrana plasmática, expondo assim o PS ao ambiente celular externo. A anexina V conjugada com FITC, uma proteína de ligação a fosfolipídios dependente de Ca2 +, pode se ligar especificamente ao PS exposto. O iodeto de propídio (PI) é um corante de ligação ao ácido nucléico, que se liga fortemente aos ácidos nucléicos nas células e tinge as células com fluorescência vermelha. PI é imperceptível para células vivas e células apoptóticas precoces, então a combinação de Anexina V-FITC e coloração de PI permite a diferenciação entre diferentes estágios de células apoptóticas e células de necrose.

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