O p24 é uma proteína estrutural importante altamente conservada e mais abundante nos vírions do HIV. É um produto codificado pelo gene estrutural gag e desempenha um papel fundamental no empacotamento e maturação do vírus. O vetor lentiviral é um sistema de vetor viral modificado com base no vírus HIV-1, que pode transferir eficientemente o gene alvo para as células. O conteúdo da proteína p24 representa o número de partículas de lentivírus, portanto, o título físico do lentivírus pode ser determinado pelo ensaio do conteúdo de p24 pelo método ELISA. Este kit usa o Ensaio de Imunoabsorção Enzimática Sanduíche (ELISA) para medir a quantidade de HIV-p24 no sobrenadante lentiviral. A microplaca ELISA no kit é pré-revestida com um anticorpo anti-HIV-p24 humano de alta afinidade. O lisado do vírus e a amostra padrão ou de teste são adicionados aos poços de microplacas. Após a incubação, o HIV-p24 presente na amostra será ligado especificamente ao anticorpo pré-revestido nos poços das microplacas. Após a lavagem, o anticorpo anti-detecção de HIV-p24 humano marcado com biotina é adicionado aos poços das microplacas. Após a reincubação, o anticorpo de detecção será ligado especificamente ao HIV-p24 ancorado nos poços das microplacas. Posteriormente, a estreptavidina marcada com peroxidase de rábano (Streptavidin-HRP) é adicionada aos poços de microplacas e incubada. A biotina e a estreptavidina no anticorpo de detecção produzem o complexo imune “anticorpo revestido-HIV-p24 anticorpo de detecção de proteína-estreptavidina-HRP” por meio de ligação não covalente de alta resistência. Após a lavagem novamente, o substrato cromogênico TMB é adicionado aos poços. O HRP catalisa o substrato TMB para criar coloração azul, com intensidade positivamente correlacionada com a concentração de HIV-p24 na amostra. A reação é interrompida pela adição de solução de parada e a absorbância é medida a 450 nm (comprimento de onda de referência 570-630 nm). Uma curva padrão é desenhada para calcular a concentração de HIV-p24 na amostra com base no valor de absorbância. Este kit é altamente específico, tem alta sensibilidade de detecção e é conveniente de usar.
Armazenamento:
a 2 ~ 8 °C no escuro por um ano.
Transporte:
saco de gelo (4 ° C)
Manual
