Vacina
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Este produto contém enzima de encapsulamento do vírus vacínia, estrutura de encapsulamento de mRNA 2′-O-metiltransferase e outros componentes de reação de encapsulamento, que podem ser usados para modificação de encapsulamento 5′ do RNA produzido pela transcrição in vitro T7 (JT101).
Em eucariotos, após a transcrição para formar o mRNA original, uma estrutura especial de cap precisa ser formada na extremidade 5′. Essa estrutura desempenha um papel importante na estabilidade, transporte (saída) e tradução do mRNA. A modificação de capping da extremidade 5′ do RNA pela reação enzimática de enzimas de capping é um método simples e eficaz: a enzima de capping da vacínia pode anexar o cap de 7-metilguanilato (m7Gppp, Cap0) à extremidade 5′ do RNA para formar m7Gppp5’N-mRNA (Cap0-mRNA). O mRNA Cap 2′-O-metiltransferas usa CAP0-mRNA como substrato e SAM (S-adenosina metionina) como doador de metil para metilar 2′-oh do primeiro nucleotídeo da extremidade 5′ do cap0-mrna adjacente à estrutura de cap para formar Cap1-mRNA.
A estrutura do Cap1 pode melhorar a estabilidade do mRNA, o que ajuda a aumentar sua capacidade de expressão em experimentos de transfecção celular e microinjeção.
Este produto utiliza a enzima de encapsulamento do vírus vacínia e a mRNA Cap-2′-O-metiltransferase simultaneamente na reação de encapsulamento, permitindo que a reação de encapsulamento seja concluída na mesma reação. O produto da reação é o mRNA Cap1, e a eficiência de encapsulamento pode ser próxima de 100% com a orientação correta da cap.
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Este produto contém enzima de encapsulamento do vírus vacínia, estrutura de encapsulamento de mRNA 2′-O-metiltransferase e outros componentes de reação de encapsulamento, que podem ser usados para modificação de encapsulamento 5′ do RNA produzido pela transcrição in vitro T7 (JT101).
Em eucariotos, após a transcrição para formar o mRNA original, uma estrutura especial de cap precisa ser formada na extremidade 5′. Essa estrutura desempenha um papel importante na estabilidade, transporte (saída) e tradução do mRNA. A modificação de capping da extremidade 5′ do RNA pela reação enzimática de enzimas de capping é um método simples e eficaz: a enzima de capping da vacínia pode anexar o cap de 7-metilguanilato (m7Gppp, Cap0) à extremidade 5′ do RNA para formar m7Gppp5’N-mRNA (Cap0-mRNA). O mRNA Cap 2′-O-metiltransferas usa CAP0-mRNA como substrato e SAM (S-adenosina metionina) como doador de metil para metilar 2′-oh do primeiro nucleotídeo da extremidade 5′ do cap0-mrna adjacente à estrutura de cap para formar Cap1-mRNA.
A estrutura do Cap1 pode melhorar a estabilidade do mRNA, o que ajuda a aumentar sua capacidade de expressão em experimentos de transfecção celular e microinjeção.
Este produto utiliza a enzima de encapsulamento do vírus vacínia e a mRNA Cap-2′-O-metiltransferase simultaneamente na reação de encapsulamento, permitindo que a reação de encapsulamento seja concluída na mesma reação. O produto da reação é o mRNA Cap1, e a eficiência de encapsulamento pode ser próxima de 100% com a orientação correta da cap.
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Este produto catalisa a conversão de ATP em AMP e incorpora-se sequencialmente à extremidade 3′ do RNA, o que dispensa a presença de moldes, ou seja, adiciona Poli(A) à extremidade 3′ do mRNA. A modificação por poliadenilação aumenta a estabilidade do RNA nas células e aumenta a eficiência da expressão do RNA após transfecção ou microinjeção. Este produto apresenta uma altíssima eficiência de formação de caudas e pode ser utilizado na modificação da formação de caudas do mRNA após transcrição in vitro (JT101) e capeamento (LC101), preparando amostras de RNA para transfecção celular.
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Este produto catalisa a conversão de ATP em AMP e incorpora-se sequencialmente à extremidade 3′ do RNA, o que dispensa a presença de moldes, ou seja, adiciona Poli(A) à extremidade 3′ do mRNA. A modificação por poliadenilação aumenta a estabilidade do RNA nas células e aumenta a eficiência da expressão do RNA após transfecção ou microinjeção. Este produto apresenta uma altíssima eficiência de formação de caudas e pode ser utilizado na modificação da formação de caudas do mRNA após transcrição in vitro (JT101) e capeamento (LC101), preparando amostras de RNA para transfecção celular.
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Este kit foi desenvolvido para transcrever eficientemente a sequência de DNA no downstream do promotor T7, contida em DNA plasmidial superenrolado ou DNA linear como moldes, utilizando a RNA polimerase T7 em uma mistura de reação de transcrição in vitro otimizada. É adequado para a preparação de RNA de alta concentração com comprimento superior a 6.000 nt. Utilizando 1 μg de molde de DNA, é possível gerar de 150 a 280 μg de RNA em uma mistura de reação de 20 μl (caso sejam necessários produtos de RNA em nível de miligrama, a mistura de reação pode ser escalonada em paralelo). O RNA preparado pode ser utilizado para tradução in vitro, ensaios de proteção de RNase, cisalhamento de RNA e marcação de sondas de hibridização.
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Este kit foi desenvolvido para transcrever eficientemente a sequência de DNA no downstream do promotor T7, contida em DNA plasmidial superenrolado ou DNA linear como moldes, utilizando a RNA polimerase T7 em uma mistura de reação de transcrição in vitro otimizada. É adequado para a preparação de RNA de alta concentração com comprimento superior a 6.000 nt. Utilizando 1 μg de molde de DNA, é possível gerar de 150 a 280 μg de RNA em uma mistura de reação de 20 μl (caso sejam necessários produtos de RNA em nível de miligrama, a mistura de reação pode ser escalonada em paralelo). O RNA preparado pode ser utilizado para tradução in vitro, ensaios de proteção de RNase, cisalhamento de RNA e marcação de sondas de hibridização.
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