Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 (from ChiPSC12) Kit
R$53.175,63
O kit Cellartis Enhanced hiPS-HEP v2 (de ChiPSC12) é um sistema completo e otimizado para a manutenção de longo prazo das células Cellartis Enhanced hiPS-HEP (de ChiPSC12). Essas células, incluídas no kit, são hepatócitos humanos criopreservados derivados da linhagem de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos Cellartis 12 (ChiPSC12). O kit Cellartis Enhanced hiPS-HEP v2 (da ChiPSC12) também contém um kit para descongelar e plaquear as células e um meio de manutenção de longo prazo adequado para até 19 dias de cultura celular.
Disponível por encomenda
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O Chaperone Plasmid Set consiste em cinco plasmídeos diferentes, cada um dos quais é projetado para expressar múltiplas chaperonas moleculares que funcionam como uma “equipe de chaperone” para permitir o dobramento de proteínas. A co-expressão de uma proteína alvo com uma dessas equipes de chaperonas aumenta a recuperação de proteínas solúveis. Cada plasmídeo carrega uma origem de replicação derivada de pACYC e um gene Cm r , que permite o uso com sistemas de expressão de E. coli utilizando plasmídeos do tipo ColE1 contendo um gene de resistência à ampicilina como marcador. Os genes chaperone estão situados a jusante de um araB ou Pzt-1(tet) promotor. Portanto, a expressão de proteínas alvo e chaperonas pode ser induzida individualmente se o gene alvo for colocado sob o controle de outros promotores (por exemplo, lac ). Esses plasmídeos também contêm o regulador necessário ( araC ou tetr ) para cada promotor.
Use este conjunto para realizar um método de duas etapas para construir sistemas de co-expressão de alvo/chaperona: Na primeira etapa, prepare um hospedeiro E. coli transformado apenas com o plasmídeo chaperona. O segundo passo é preparar células competentes a partir desta nova estirpe e transformar esta estirpe com um plasmídeo que expressa a proteína alvo.
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O kit SMARTer RACE 5’/3′ permite a síntese de cDNA de primeira fita a partir de poli A+ ou RNA total via tecnologia SMART ( S witching Mechanism A t 5′ End of R NA T emplate ) e facilita o desempenho de 5′ – e 3′-RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) PCR com o Universal Primer Mix do kit. Nosso SMARTer Oligo cuidadosamente projetado e especialmente modificado captura preferencialmente as extremidades 5′ do cDNA durante a síntese de cDNA. Usando este SMARTer Oligo, nosso procedimento enriquece os pools de cDNA para sequências 5′, aumentando assim a probabilidade de você amplificar toda a sequência do seu gene.
Os produtos RACE PCR são amplificados com a SeqAmp DNA Polimerase fornecida e clonados no vetor linearizado pRACE com In-Fusion HD Cloning. O kit SMARTer RACE 5’/3′ foi aprimorado para acomodar volumes maiores de entrada de RNA e ter melhor desempenho em alvos desafiadores do que o kit de amplificação de cDNA SMARTer RACE original. O In-Fusion HD Cloning Kit, NucleoSpin Gel e PCR Clean-Up Kit e Stellar Competent Cells estão incluídos para sua conveniência na clonagem de produtos RACE. Os primers RACE específicos do gene são fornecidos pelo usuário.
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O SapphireAmp Fast PCR Master Mix foi projetado para PCR rápido e simplificado e, portanto, é ideal para aplicações como PCR de colônia. Ele contém uma enzima PCR hotstart, tampão otimizado, dNTPs, juntamente com um corante de carregamento de gel azul e reagente de densidade, em um formato conveniente de pré-mistura 2X.
As reações são montadas simplesmente misturando primers e molde de DNA com SapphireAmp Fast PCR Master Mix. Para uma triagem rápida e conveniente, as reações de amplificação podem ser carregadas diretamente em um gel de agarose imediatamente após a amplificação sem purificação ou digeridas diretamente com enzimas de restrição.
Para PCR de colônias baseadas em E. coli , inserções de até ~5 kb de comprimento são facilmente rastreadas; A PCR da colônia pode ser realizada em cerca de uma hora.
Para DNA genômico humano, a amplificação de alvos de 2 kb pode ser completada em uma hora; amplificações de até 6 kb são possíveis.
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TaKaRa Ex Taq DNA Polymerase combina o desempenho comprovado da Takara Taq polimerase com a atividade de revisão de uma exonuclease 3′-5 ‘eficiente, para reações de PCR de alta sensibilidade e alta eficiência. Também pode ser usado para PCR de longo alcance (até 20 kb de modelos de DNA genômico e até 30 kb de modelos de DNA lambda). A polimerase Ex Taq tem uma fidelidade maior do que a Taq padrão com uma taxa de mutação aproximadamente 4,5 vezes menor, conforme determinado pelo método de Kunkel. A polimerase Ex Taq é fornecida com tampão 10X otimizado (com ou sem Mg 2+ ) e dNTPs.