A interleucina-6 (IL-6) é uma citocina que tem um papel multifuncional em vários processos biológicos, incluindo resposta imune, metabolismo ósseo, hematopoiese e desenvolvimento tumoral. A IL-6 tem uma estrutura α-helicoidal com um peso molecular de 22-28 kDa e pode ser facilmente fosforilada e glicosilada. A IL-6 está associada à inflamação e é uma citocina típica que é secretada por células linfóides (como células T e células B) e certas células não linfóides (como macrófagos, monócitos e mastócitos) durante a infecção ou dano tecidual. Sua secreção desempenha um papel importante no sistema de defesa do hospedeiro, limpando as células infectadas ou o tecido danificado. Mas a superprodução de IL-6 pode levar ao desenvolvimento de doenças inflamatórias crônicas e tempestades de citocinas.
Este kit usa o Ensaio de Imunoabsorção Enzimática Sanduíche (ELISA) para medir a quantidade de IL-6 no sobrenadante de soro humano, plasma e cultura de células. A microplaca ELISA no kit é pré-revestida com um anticorpo anti-IL-6 humano de alta afinidade. A amostra padrão ou de teste e um anticorpo anti-detecção de IL-6 humano marcado com biotina são adicionados aos poços de microplacas ao mesmo tempo. Após a incubação, a IL-6 presente na amostra será ligada especificamente ao anticorpo pré-revestido e ao anticorpo de detecção. Após a lavagem, uma estreptavidina marcada com peroxidase de rábano (Streptavidin-HRP) é adicionada aos poços da microplaca e incubada. A biotina e a estreptavidina no anticorpo de detecção produzem o complexo imune “anticorpo revestido-anticorpo de detecção de proteína IL-6 humana-estreptavidina-HRP” por meio de ligação não covalente de alta resistência. Após a lavagem novamente, o substrato cromogênico TMB é adicionado aos poços. O HRP catalisa o substrato TMB para criar coloração azul, com intensidade positivamente correlacionada com a concentração de IL-6 na amostra. A reação é interrompida pela adição de solução de parada e a absorbância é medida a 450 nm (comprimento de onda de referência 570-630 nm). Uma curva padrão é desenhada para calcular a concentração de IL-6 na amostra com base no valor de absorbância. Este kit é altamente específico, tem alta sensibilidade de detecção e é conveniente de usar.
Armazenamento
a 2 ~ 8 ° C no escuro por um ano
