O fator de necrose tumoral α (TNF-α) é uma citocina multifuncional. É produzido e secretado principalmente por macrófagos e monócitos ativados, que podem matar diretamente as células tumorais sem toxicidade óbvia para as células normais. O TNF-α também tem uma variedade de efeitos reguladores imunológicos. Como uma espécie de pirogênio endógeno, o TNF-α pode induzir febre, morte celular, má qualidade, inflamação e inibir a ocorrência de tumores e a replicação do vírus, e responder à sepse produzindo IL-1 e IL-6 nas células. Os distúrbios de expressão do TNF-α estão relacionados a uma variedade de doenças, como infecção, doença autoimune, câncer, aterosclerose, doença de Alzheimer, doença inflamatória intestinal e degeneração do disco intervertebral, etc. Este kit usa o Ensaio de Imunoabsorção Enzimática Sanduíche (ELISA) para medir a quantidade de TNF-α no sobrenadante de soro humano, plasma e cultura de células. A microplaca ELISA no kit é pré-revestida com um anticorpo anti-TNF-α humano de alta afinidade. A amostra padrão ou de teste é adicionada aos poços de microplacas. Após a incubação, o TNF-α presente na amostra será ligado especificamente ao anticorpo pré-revestido nos poços das microplacas. Após a lavagem, o anticorpo anti-detecção de TNF-α humano marcado com biotina é adicionado aos poços das microplacas. Após a reincubação, o anticorpo de detecção será ligado especificamente ao TNF-α ancorado nos poços das microplacas. Posteriormente, a estreptavidina marcada com peroxidase de rábano (Streptavidin-HRP) é adicionada aos poços de microplacas e incubada. A biotina e a estreptavidina no anticorpo de detecção produzem o complexo imune “anticorpo revestido-anticorpo de detecção de proteína TNF-α humano-estreptavidina-HRP” por meio de ligação não covalente de alta resistência. Após a lavagem novamente, o substrato cromogênico TMB é adicionado aos poços. O HRP catalisa o substrato TMB para criar coloração azul, com intensidade positivamente correlacionada com a concentração de TNF-α na amostra. A reação é interrompida pela adição de solução de parada e a absorbância é medida a 450 nm (comprimento de onda de referência 570-630 nm). Uma curva padrão é desenhada para calcular a concentração de TNF-α na amostra com base no valor de absorbância. Este kit é altamente específico, tem alta sensibilidade de detecção e é conveniente de usar.
Armazenamento
a 2 ~ 8 ° C no escuro por um ano
