Lenti-X SARS-CoV-2 Packaging Single Shots (Universal), 16 Rxns
R$18.785,25
Lenti-X SARS-CoV-2 Packaging Single Shots (Universal) permite a produção simplificada de lentivírus de alto título pseudotipado com sua proteína de pico SARS-CoV-2 de interesse, fornecendo tubos únicos pré-aliquotados, liofilizados de Xfect Transfection Reagent pré-misturado com uma formulação otimizada de plasmídeos de embalagem lentiviral Lenti-X. A produção de pseudovírus envolveu simplesmente diluir um vetor de expressão variante de pico SARS-CoV-2 e seu vetor de transferência de escolha em água, adicionar a um tubo de doses únicas e aplicar a mistura a células 293T (por exemplo, Lenti-X 293T Cells, Cat. # 632180) em um prato de 10 cm.
Cada kit inclui 16 tubos de Lenti-X Packaging Single Shots (Sem envelope; Cat. # 631297), o vetor pEmpty (Cat. # 631298) para clonagem e expressão da proteína de pico SARS-CoV-2 desejada, o Lenti- X SARS-CoV-2 Spike Vector Set (Cat. # 631296), que inclui três plasmídeos que codificam as variantes de pico SARS-CoV-2 truncada D614G, B.1.1.7 e B.1.351 e o Lenti-X Reporter Vector Set (Cat. # 632677). Cat. # 632677 inclui dois vetores de transferência lentiviral auto-inativados que codificam ZsGreen1 e luciferase de vaga-lume, respectivamente, sob o promotor CMV, para serem usados como repórteres para transdução viral.
Disponível por encomenda
Visão geral
- Pseudovírus SARS-CoV-2 personalizável: produza qualquer variante de proteína de pico SARS-CoV-2 necessária para sua pesquisa
- Procedimento de clonagem simples: o vetor pEmpty fornecido emparelhado com o In-Fusion Snap Assembly facilita a produção de plasmídeo de proteína variante de pico
- O sistema de embalagem de alto desempenho produz títulos altos de forma consistente: evite gastar tempo otimizando reagentes, concentre-se em seus ensaios a jusante
- O formato conveniente de disparos únicos minimiza o tempo prático e a probabilidade de erros: basta adicionar água contendo o vetor variante de pico SARS-CoV-2 e o vetor de transferência lentiviral e aplicar às células de embalagem
- Plasmídeos variantes da proteína spike B.1.351, B.1.1.7 e D614G SARS-CoV-2 incluídos: use diretamente na reação Lenti-X SARS-CoV-2 Single Shots (Universal) ou como modelo para a criação de SARS adicional -Mutantes variantes de pico de CoV-2
- Acompanha linha celular ACE2 também disponível
Mais Informações
Fluxo de trabalho simplificado em uma etapa
Fluxo de trabalho para produção de pseudovírus usando Lenti-X SARS-CoV-2 Packaging Single Shots (Universal).
Transdução eficiente de células positivas para ACE2
Transdução de uma linhagem celular ACE2-positiva com pseudovírus SARS-CoV-2. Lenti-X Packaging Single Shots (Universal) foi usado para produzir pseudovírus truncado SARS-CoV-2 spike B.1.1.7 que codifica a proteína fluorescente ZsGreen (Painel A) ou SARS-CoV-2 spike B.1.1.7 pseudovírus que codifica vaga-lume luciferase (Painel B). Painel A. Sobrenadante concentrado (20X; 30 ou 10 µl) foi usado para transduzir uma linha de células HEK293T expressando de forma estável o receptor ACE2 humano na presença de 6 µg/ml de polibreno em placas de 48 poços. As eficiências de transdução para cada amostra foram medidas por citometria de fluxo 6 dias após a transdução. A porcentagem de células positivas para ZsGreen (ZsGreen+) e a intensidade de fluorescência média (MFI) são mostradas. Painel B.O sobrenadante concentrado (20X; 30, 20 ou 10 µl) foi usado para transduzir uma linha de células HEK293T expressando de forma estável o receptor ACE2 humano na presença de 6 µg/ml de polibreno em placas de 48 poços. As células HEK293T sem o transgene ACE2 foram transduzidas para determinar os níveis de luminescência de fundo (NC; controle negativo). Os valores de luminescência para cada amostra foram medidos 6 dias após a transdução.
Informações adicionais do produto
Consulte o Certificado de Análise do produto para obter informações sobre as condições de armazenamento, componentes do produto e especificações técnicas. Consulte a Lista de componentes do kit para determinar os componentes do kit. Os Certificados de Análise e as Listas de Componentes do Kit estão localizados na guia Documentos.
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