mRNA Poly(A) Tailing Kit (25 rxns)
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Este produto catalisa a conversão de ATP em AMP e incorpora-se sequencialmente à extremidade 3′ do RNA, o que dispensa a presença de moldes, ou seja, adiciona Poli(A) à extremidade 3′ do mRNA. A modificação por poliadenilação aumenta a estabilidade do RNA nas células e aumenta a eficiência da expressão do RNA após transfecção ou microinjeção. Este produto apresenta uma altíssima eficiência de formação de caudas e pode ser utilizado na modificação da formação de caudas do mRNA após transcrição in vitro (JT101) e capeamento (LC101), preparando amostras de RNA para transfecção celular.
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FlyCut PvuI é expresso e purificado de E. coli que carrega o gene PvuI recombinante. Seu peso molecular é 30,8 kDa, com o local de reconhecimento em CGAT ^ CG. A reação é conduzida por 5-15 minutos a 37 ℃ e inativada pelo calor a 80 ℃ por 20 minutos. Esta enzima não é sensível a dam, dcm, mas é sensível à metilação CpG de mamíferos.
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Este produto é adequado para isolar miRNA e RNA total de células, tecidos, sangue fresco e exossomos. Após as amostras serem lisadas com tampão de lise, a adição de clorofórmio à amostra lisada separa a solução para uma fase aquosa incolor superior contendo RNA, uma interfase e uma fase orgânica rosa inferior. Após a adição de etanol à fase aquosa transferida, o RNA total pode ser imobilizado especificamente por uma coluna de rotação de RNA. Ao ajustar o volume de etanol adicionado à fase aquosa, RNAs grandes (incluindo 28S rRNA, 18S rRNA e mRNA) são imobilizados enquanto RNAs pequenos (≤ 200 nt, como miRNA, siRNA, shRNA, snRNA, etc.) fluxo através do qual é passado através de uma coluna de spin de miRNA onde os miRNAs ficam imobilizados após a adição de mais etanol.
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EasyScript First-Strand cDNA Synthesis SuperMix fornece todos os componentes necessários para a síntese de cDNA a partir do RNA total ou mRNA. O cDNA é eficientemente sintetizado pelo EasyScript RT/RI Enzyme Mix e 2 × ES Reaction Mix.
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O kit TransDirect Plant Tissue PCR usa um tampão de lise exclusivo para lisar tecidos vegetais (frescos ou congelados). O lisado resultante sem purificação pode ser usado diretamente como molde de PCR. 2 × TransDirect PCR SuperMix (+ corante) é altamente resistente a vários inibidores de PCR presentes em tecidos vegetais. O produto PCR pode ser usado diretamente para eletroforese em gel.