Proteinase K (Powder), 100Mg

Atividade específica: 40 U/mg de proteína
Contém 100 mg de proteinase K, pó liofilizado.

Características
Ativo em uma ampla gama de produtos de reação

Descrição
Proteinase K é uma protease endolítica que cliva ligações peptídicas nos lados carboxílicos de aminoácidos alifáticos, aromáticos ou hidrofóbicos.
A Proteinase K é classificada como uma serina protease. O menor peptídeo a ser hidrolisado por essa enzima é um tetrapeptídeo.

Aplicações
Isolamento de DNA genômico de células e tecidos cultivados;
Remoção de DNases e RNases ao isolar DNA e RNA de tecidos ou linhas celulares;
Melhora a eficiência de clonagem de produtos de PCR.

Inibição e Inativação
Inibidores: a proteinase K não é inativada por quelantes de metal, por reagentes reativos com tiol ou por inibidores específicos de tripsina e quimiotripsina. O fluoreto de fenilmetilsulfonil e o diisopropil fosforofluoridato inibem completamente a enzima.
Inativado por aquecimento a 95 °C por 10 minutos.

Observação

• Atividade ótima em 50-55 ° C.
• A desnaturação rápida da enzima ocorre em temperaturas acima de 65 ° C.
• A concentração de trabalho recomendada para Proteinase K é de 0,05-1 mg /ml. A atividade da enzima é estimulada por SDS 0,2-1% ou por uréia 1-4 M.
• O Ca2 + protege a Proteinase K contra a autólise, aumenta a estabilidade térmica e tem uma função reguladora para o local de ligação do substrato da Proteinase K.
• Estável em uma ampla faixa de pH: 4,0-12,5, pH ideal 7,5-8,0.