Nota A concentração ótima para RNase A é de 1-100 ug/ml, dependendo da aplicação. |
A enzima é ativa sob uma grande variedade de condições de reação. Em baixas concentrações de sal (NaCl 0 a 100 mM), a RNase A cliva o RNA de cadeia simples e de cadeia dupla, bem como a cadeia de RNA em híbridos de RNA-DNA. No entanto, em concentrações de NaCl de 0.3M ou superior, a RNase A cliva especificamente o RNA de cadeia simples. |
RNase A (Lyophilized Powder), 100mg
R$383,28
RNase A
N9046 (100MG)
Atividade específica: >2.500 u/mg proteínas (>units/mg proteínas)
Formato: contém 100mg de RNase A liofilizada.
Armazenar em temperatura ambiente por até um ano. Para um período maior armazenar em 4°C.
Descrição
RNase A, livre de DNase e proteases é uma endoribonuclase que degraga especificamente fitas únicas de RNA, clivando as ligações de fosfodiéster entre 5’ ribose do nucleotídeo e o grupo fosfato anexado a 3’ ribose de um nucleotídeo de pirimidina adjacente. O 2′, 3′-fosfato cíclico resultante é hidrolisado ao 3′ nucleosídeo fosfato correspondente.
Aplicações
Preparação de DNA genomico e plasmídeos
Remoção do RNA a partir de amostras de proteína recombinante
Ensaios de proteção à ribonuclease
Mapeamento de mutações de uma única base de DNA ou RNA
Controle de Qualidade
A ausência de endodesoxirribonucleases, exodeoxiribonucleases e proteases foi confirmada por testes de qualidade adequados. Funcionalmente testadas para a digestão de RNA em um procedimento de purificação de DNA plasmidial.
Fonte
Pâncreas bovino.
Peso Molecular
13,7 kDa monómero.
Definição de Atividade por Unidade
Uma unidade da enzima provoca um aumento na absorbância de 1,0 a 260nm quando RNA de levedura é hidrolisado a 37°C e pH 5.0
Cinquenta unidades equivalem a aproximadamente equivalente a 1 unidade de Kunitz
Inibição e Inativação
Inibidores: O inibidor mais potente é uma proteína de ~50 kDa a partir de citosol de células de mamíferos, por exemplo, RiboLock™ RNase inibidor.
Outros inibidores: uridina 2′, 3′ vanadato cíclico, 5′-difosfoadenosina 3′-fosfato e 5′-difosfoadenosina 2′-fosfato (2), SDS, dietil pirocarbonato, guanidínio tiocianato 4M mais 0,1 M de 2-mercaptoetanol e íons de metais pesados. Inativado por extração com fenol / clorofórmio.
Inativado por extração com fenol/clorofórmio.
Inativado por aquecimento a 95°C durante 10 minutos.
Disponível por encomenda
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HSTM Taq DNA Polymerase é uma enzima DNA polimerase termoestável derivada da bactéria Thermus aquaticus. O peso molecular da enzima é de 94kDa. HSTM Taq DNA Polymerase pode amplificar DNA de até 5kb. A velocidade de amplificação é de 0.9~1.2kb/min. A enzima tem atividade exonuclease 5’ – 3’, mas, não tem atividade 3’ – 5’ o que resulta em finalização com 3’-dA no produto da PCR.
Todos os componentes do HSTM PCR Buffer tem uma concentração ótima para amplificação eficiente. A atividade termoestável contribui para incorporação específica dos primers na amostra.10 x HSTM PCR Buffer (Mg2+ Plus)
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A enzima é fornecida em: Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), contendo cloreto de cálcio 5 mM e glicerol a 50% (v/v).Inibição e Inativação
Inibidores: a proteinase K não é inativada por quelantes de metal, por reagentes reativos com tiol ou por inibidores específicos de tripsina e quimiotripsina. O fluoreto de fenilmetilsulfonil e o diisopropil fosforofluoridato inibem completamente a enzima.
Inativado por aquecimento a 95 °C por 10 minutos.Observação
- Atividade ótima em 50-55 ° C.
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O DNA Ladder de 10 pb é ideal para determinar o tamanho do DNA de fita dupla de 80 a 300 pares de bases. A marcador consiste em 18 fragmentos lineares de fita dupla.
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Os fragmentos de 100 pb e 200 pb são 100 ng. Este marcador é pré-misturado com corante e está pronto para uso.Carregamento recomendado
2-5 ulConcentração
Bandas em evidência 100 ng / 5 ul
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