SMART-Seq® mRNA LP (with UMIs), 24rxns
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O SMART-Seq mRNA LP (com UMIs) gera bibliotecas de mRNA-seq de comprimento total com oligo(dT) com UMIs, fornecendo maior precisão para análise quantitativa de expressão gênica em amostras, enquanto controla erros de PCR e vieses de amplificação. A química é otimizada para uso em quantidades ultrabaixas de RNA total (10 pg–100 ng, RIN≥8) ou para uso direto em várias células intactas (<1.000 células).
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O meio de cultura sem antibióticos Cellartis DEF-CS 500 destina-se à expansão de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos (iPS) em condições completamente livres de componentes derivados de humanos e animais. As células são cultivadas na ausência de células alimentadoras; em vez disso, é usado um substrato livre de xeno, como o iMatrix-511 . O protocolo de cultura usa passagem de célula única suave e não enzimática para garantir condições controladas e reprodutíveis. As células cultivadas em meio de cultura sem antibiótico Cellartis DEF-CS 500 Xeno-Free têm uma alta taxa de proliferação e cariótipo estável, permitindo um aumento de escala eficiente. A combinação desses recursos torna este meio ideal para gerar células iPS de grau pré-clínico para estudos de medicina regenerativa.
Cellartis DEF-CS 500 Xeno-Free Meio de Cultura sem Antibióticos inclui 500 ml de meio basal e aditivos necessários durante as trocas de meios e passagem. Os aditivos sem xeno Cellartis DEF-CS 500 (Cat. # Y30042) também são vendidos separadamente.
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O kit SMARTer RACE 5’/3′ permite a síntese de cDNA de primeira fita a partir de poli A+ ou RNA total via tecnologia SMART ( S witching Mechanism A t 5′ End of R NA T emplate ) e facilita o desempenho de 5′ – e 3′-RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) PCR com o Universal Primer Mix do kit. Nosso SMARTer Oligo cuidadosamente projetado e especialmente modificado captura preferencialmente as extremidades 5′ do cDNA durante a síntese de cDNA. Usando este SMARTer Oligo, nosso procedimento enriquece os pools de cDNA para sequências 5′, aumentando assim a probabilidade de você amplificar toda a sequência do seu gene.
Os produtos RACE PCR são amplificados com a SeqAmp DNA Polimerase fornecida e clonados no vetor linearizado pRACE com In-Fusion HD Cloning. O kit SMARTer RACE 5’/3′ foi aprimorado para acomodar volumes maiores de entrada de RNA e ter melhor desempenho em alvos desafiadores do que o kit de amplificação de cDNA SMARTer RACE original. O In-Fusion HD Cloning Kit, NucleoSpin Gel e PCR Clean-Up Kit e Stellar Competent Cells estão incluídos para sua conveniência na clonagem de produtos RACE. Os primers RACE específicos do gene são fornecidos pelo usuário.
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Com este sistema, as células são mantidas em um estado indiferenciado com praticamente nenhuma diferenciação de fundo, eliminando a necessidade de seleção de células. A natureza altamente reprodutível do sistema, juntamente com sua capacidade de garantir uma taxa de crescimento eficiente e previsível, torna o sistema de cultura DEF-CS ideal para a expansão e ampliação de uma população homogênea de células iPS. Após a reprogramação, a expansão bem-sucedida de suas células-tronco pluripotentes é crucial. O sistema de cultura DEF-CS, um sistema de grau de pesquisa, fornece mídia, um reagente de revestimento e fatores de crescimento para a fácil cultura de células iPS como uma monocamada 2D.