SMART-Seq® mRNA LP (with UMIs), 4x96rxns
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O SMART-Seq mRNA LP (com UMIs) gera bibliotecas de mRNA-seq de comprimento total com oligo(dT) com UMIs, fornecendo maior precisão para análise quantitativa de expressão gênica em amostras, enquanto controla erros de PCR e vieses de amplificação. A química é otimizada para uso em quantidades ultrabaixas de RNA total (10 pg–100 ng, RIN≥8) ou para uso direto em várias células intactas (<1.000 células).
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O EmeraldAmp MAX HS PCR Master Mix é a versão hotstart (HS) mediada por anticorpos do EmeraldAmp MAX PCR Master Mix . A inclusão de um anticorpo evita a ativação incorreta e a amplificação não específica durante a configuração da PCR.
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O Chaperone Plasmid Set consiste em cinco plasmídeos diferentes, cada um dos quais é projetado para expressar múltiplas chaperonas moleculares que funcionam como uma “equipe de chaperone” para permitir o dobramento de proteínas. A co-expressão de uma proteína alvo com uma dessas equipes de chaperonas aumenta a recuperação de proteínas solúveis. Cada plasmídeo carrega uma origem de replicação derivada de pACYC e um gene Cm r , que permite o uso com sistemas de expressão de E. coli utilizando plasmídeos do tipo ColE1 contendo um gene de resistência à ampicilina como marcador. Os genes chaperone estão situados a jusante de um araB ou Pzt-1(tet) promotor. Portanto, a expressão de proteínas alvo e chaperonas pode ser induzida individualmente se o gene alvo for colocado sob o controle de outros promotores (por exemplo, lac ). Esses plasmídeos também contêm o regulador necessário ( araC ou tetr ) para cada promotor.
Use este conjunto para realizar um método de duas etapas para construir sistemas de co-expressão de alvo/chaperona: Na primeira etapa, prepare um hospedeiro E. coli transformado apenas com o plasmídeo chaperona. O segundo passo é preparar células competentes a partir desta nova estirpe e transformar esta estirpe com um plasmídeo que expressa a proteína alvo.
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