SMART-Seq® mRNA LP (with UMIs), 96rxns
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O SMART-Seq mRNA LP (com UMIs) gera bibliotecas de mRNA-seq de comprimento total com oligo(dT) com UMIs, fornecendo maior precisão para análise quantitativa de expressão gênica em amostras, enquanto controla erros de PCR e vieses de amplificação. A química é otimizada para uso em quantidades ultrabaixas de RNA total (10 pg–100 ng, RIN≥8) ou para uso direto em várias células intactas (<1.000 células).
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O Chaperone Plasmid Set consiste em cinco plasmídeos diferentes, cada um dos quais é projetado para expressar múltiplas chaperonas moleculares que funcionam como uma “equipe de chaperone” para permitir o dobramento de proteínas. A co-expressão de uma proteína alvo com uma dessas equipes de chaperonas aumenta a recuperação de proteínas solúveis. Cada plasmídeo carrega uma origem de replicação derivada de pACYC e um gene Cm r , que permite o uso com sistemas de expressão de E. coli utilizando plasmídeos do tipo ColE1 contendo um gene de resistência à ampicilina como marcador. Os genes chaperone estão situados a jusante de um araB ou Pzt-1(tet) promotor. Portanto, a expressão de proteínas alvo e chaperonas pode ser induzida individualmente se o gene alvo for colocado sob o controle de outros promotores (por exemplo, lac ). Esses plasmídeos também contêm o regulador necessário ( araC ou tetr ) para cada promotor.
Use este conjunto para realizar um método de duas etapas para construir sistemas de co-expressão de alvo/chaperona: Na primeira etapa, prepare um hospedeiro E. coli transformado apenas com o plasmídeo chaperona. O segundo passo é preparar células competentes a partir desta nova estirpe e transformar esta estirpe com um plasmídeo que expressa a proteína alvo.
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TaKaRa Ex Taq DNA Polymerase combina o desempenho comprovado da Takara Taq polimerase com a atividade de revisão de uma exonuclease 3′-5 ‘eficiente, para reações de PCR de alta sensibilidade e alta eficiência. Também pode ser usado para PCR de longo alcance (até 20 kb de modelos de DNA genômico e até 30 kb de modelos de DNA lambda). A polimerase Ex Taq tem uma fidelidade maior do que a Taq padrão com uma taxa de mutação aproximadamente 4,5 vezes menor, conforme determinado pelo método de Kunkel. A polimerase Ex Taq é fornecida com tampão 10X otimizado (com ou sem Mg 2+ ) e dNTPs.
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O meio de cultura sem antibióticos Cellartis DEF-CS 500 destina-se à expansão de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos (iPS) em condições completamente livres de componentes derivados de humanos e animais. As células são cultivadas na ausência de células alimentadoras; em vez disso, é usado um substrato livre de xeno, como o iMatrix-511 . O protocolo de cultura usa passagem de célula única suave e não enzimática para garantir condições controladas e reprodutíveis. As células cultivadas em meio de cultura sem antibiótico Cellartis DEF-CS 500 Xeno-Free têm uma alta taxa de proliferação e cariótipo estável, permitindo um aumento de escala eficiente. A combinação desses recursos torna este meio ideal para gerar células iPS de grau pré-clínico para estudos de medicina regenerativa.
Cellartis DEF-CS 500 Xeno-Free Meio de Cultura sem Antibióticos inclui 500 ml de meio basal e aditivos necessários durante as trocas de meios e passagem. Os aditivos sem xeno Cellartis DEF-CS 500 (Cat. # Y30042) também são vendidos separadamente.
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RHB-A, suplementado com Fator de Crescimento Epidérmico (EGF) e Fator de Crescimento de Fibroblastos-2 (FGF-2), permite a manutenção e expansão contínua de células NS que se dividem simetricamenteem cultura aderente definida, livre de soro. Em RHB-A suplementado com fator de crescimento, as células NS demonstraram manter sua capacidade neurogênica por mais de 100 gerações, com manutenção completa do cariótipo diplóide. RHB-A na presença de EGF e FGF-2 também suporta a derivação de linhagens de células NS clonogênicas. A cultura de células NS aderentes em RHB-A com retirada sequencial do fator de crescimento leva à diferenciação em neurônios funcionais. RHB-A suplementado com EGF e FGF-2 tem sido usado recentemente para a propagação de linhagens de células-tronco de glioblastoma.