SMART-Seq Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian) User Manual
SMART-Seq® Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR® Mammalian) 24 Rxns
R$29.273,13
SMART-Seq Total RNA Pico Input com UMIs (ZapR Mammalian) gera bibliotecas de RNA-seq específicas de fita para sequenciamento Illumina a partir de entradas de 250 pg–10 ng de RNA total purificado ou de 10–1.000 células intactas. O design da biblioteca apresentado neste kit adiciona um identificador molecular exclusivo (UMI) de 8 nucleotídeos (nt) por meio da etapa de transcrição reversa para mitigar o potencial viés de PCR, bem como fornecer informações adicionais para quantificação de transcrição. Material suficiente é fornecido com este kit para realizar até 24 reações.
Disponível por encomenda
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O SapphireAmp Fast PCR Master Mix foi projetado para PCR rápido e simplificado e, portanto, é ideal para aplicações como PCR de colônia. Ele contém uma enzima PCR hotstart, tampão otimizado, dNTPs, juntamente com um corante de carregamento de gel azul e reagente de densidade, em um formato conveniente de pré-mistura 2X.
As reações são montadas simplesmente misturando primers e molde de DNA com SapphireAmp Fast PCR Master Mix. Para uma triagem rápida e conveniente, as reações de amplificação podem ser carregadas diretamente em um gel de agarose imediatamente após a amplificação sem purificação ou digeridas diretamente com enzimas de restrição.
Para PCR de colônias baseadas em E. coli , inserções de até ~5 kb de comprimento são facilmente rastreadas; A PCR da colônia pode ser realizada em cerca de uma hora.
Para DNA genômico humano, a amplificação de alvos de 2 kb pode ser completada em uma hora; amplificações de até 6 kb são possíveis.
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A polimerase de DNA TaKaRa Ex Taq combina o desempenho comprovado da polimerase Takara Taq com a atividade de revisão de uma exonuclease 3′ a 5′ eficiente, para reações de PCR de alta sensibilidade e alta eficiência. Também pode ser usado para PCR de longo alcance (até 20 kb de modelos de DNA genômico e até 30 kb de modelos de DNA lambda). A polimerase Ex Taq tem uma fidelidade maior que a Taq padrão com uma taxa de mutação aproximadamente 4,5 vezes menor, conforme determinado pelo método de Kunkel. A polimerase Ex Taq é fornecida com tampão 10X otimizado (com ou sem Mg 2+ ) e dNTPs.
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RHB-A, suplementado com Fator de Crescimento Epidérmico (EGF) e Fator de Crescimento de Fibroblastos-2 (FGF-2), permite a manutenção e expansão contínua de células NS que se dividem simetricamenteem cultura aderente definida, livre de soro. Em RHB-A suplementado com fator de crescimento, as células NS demonstraram manter sua capacidade neurogênica por mais de 100 gerações, com manutenção completa do cariótipo diplóide. RHB-A na presença de EGF e FGF-2 também suporta a derivação de linhagens de células NS clonogênicas. A cultura de células NS aderentes em RHB-A com retirada sequencial do fator de crescimento leva à diferenciação em neurônios funcionais. RHB-A suplementado com EGF e FGF-2 tem sido usado recentemente para a propagação de linhagens de células-tronco de glioblastoma.
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O meio NDiff 227 é um meio definido, isento de soro, suplementado com N2 e B-27 para diferenciação neural de células-tronco embrionárias (ES) de camundongo em monocultura aderente (Ying et al. 2003). O NDiff 227 também pode ser suplementado para permitir a cultura de células-tronco pluripotentes de longo prazo. A retirada sucessiva dos suplementos resulta na diferenciação na linhagem neural.