Streptavidin-AP Conjugate, 1 ml

A estreptavidina é uma proteína (tetrâmero) de 52,8 kDa purificada da bactéria Streptomyces avidinii , com afinidade e especificidade extremamente altas para a biotina (também conhecida como vitamina B7 ou vitamina H) ( Green, 1975) A função biológica da estreptavidina não é conhecida. No entanto, o complexo estreptavidina-biotina mostra alta resistência a solventes orgânicos, desnaturantes (por exemplo, cloreto de guanidínio), detergentes (por exemplo, SDS, Triton), enzimas proteolíticas e extremos de temperatura e pH. Como tal, é uma ferramenta muito útil para purificação e / ou detecção de biomoléculas. Ao anexar a proteína estreptavidina a uma porção, como um fluoróforo ou uma enzima. A estreptavidina conjugada com fluoróforos ou enzimas são frequentemente usadas como reagentes de marcação secundária para detectar moléculas biotiniladas em aplicações de pesquisa comuns, incluindo microscopia de imunofluorescência, ELISA, hibridização in situ, imunohistoquímica, microarrays, citometria de fluxo, western blot e outras aplicações. Uma vez que várias moléculas de biotina estão disponíveis para ligação a cada anticorpo primário, a estreptavidina pode amplificar sinais enzimáticos para uso em imunohistoquímica (IHC) e microscopia. Diferentes corantes usados ​​incluem Peridinina Clorofila Proteína Complex (PerCP), Aloficocianina (APC) und R-Ficoeritrina (RPE), Alexa Fluor®- e estreptavidina conjugada com cianina e fluoróforos como Fluoresceína isotiocianato (FITC). A estreptavidina também pode ser conjugada a enzimas como a peroxidase de rábano (HRP) e a fosfatase alcalina (AP) para imunodetecção indireta. A biotina também pode ser conjugada a estreptavidina para uso em IHC. A avidina, originalmente isolada da gema do ovo, também tem uma afinidade de ligação muito alta com a biotina. Possui apenas 30% de identidade de sequência com a estreptavidina, mas estrutura secundária, terciária e quaternária quase idêntica. No entanto, a avidina tem uma afinidade de ligação mais baixa do que a estreptavidina quando a biotina é conjugada a outra molécula, apesar da avidina ter a afinidade mais alta para a biotina livre não conjugada.