A interleucina-12 (IL-12), também conhecida como IL-12 p70, é um heterodímero composto por duas subunidades IL-12A (p35) e IL-12B (p40), com peso molecular de 70-75 kD. IL-12 p70 é uma proteína secretada que é produzida e secretada principalmente por macrófagos, células dendríticas, monócitos, neutrófilos ou outras células apresentadoras de antígenos em resposta à estimulação antigênica, desempenha um papel importante na maturação, ativação, proliferação e regulação imunológica das células imunes. Como estimulador de células T, a IL-12 p70 pode efetivamente promover a proliferação e função das células T e participar da diferenciação de células T virgens em células Th1. A IL-12 p70 é um fator de maturação de linfócitos citotóxicos. No microambiente tumoral, a IL-12 p70 estimula as células T ativadas e as células natural killer a liberar enzimas tóxicas ou secretar citocinas efetoras, como o IFN-γ. Essas moléculas efetoras são críticas para a eliminação do tumor. Este kit usa o Ensaio de Imunoabsorção Enzimática Sanduíche (ELISA) para medir a quantidade de IL-12 p70 no soro e plasma humanos. A microplaca ELISA no kit é pré-revestida com um anticorpo anti-IL-12 p70 humano de alta afinidade. A amostra padrão ou de teste é adicionada aos poços de microplacas. Após a incubação, a IL-12 p70 presente na amostra será ligada especificamente ao anticorpo pré-revestido nos poços das microplacas. Após a lavagem, o anticorpo de detecção anti-IL-12 p70 humano marcado com biotina é adicionado aos poços das microplacas. Após a reincubação, o anticorpo de detecção será ligado especificamente à IL-12 p70 ancorada nos poços das microplacas. Posteriormente, a estreptavidina marcada com peroxidase de rábano (Streptavidin-HRP) é adicionada aos poços de microplacas e incubada. A biotina e a estreptavidina no anticorpo de detecção produzem o complexo imune “anticorpo revestido-anticorpo humano de detecção de proteína IL-12 p70-estreptavidina-HRP” por meio de ligação não covalente de alta resistência. Após a lavagem novamente, o substrato cromogênico TMB é adicionado aos poços. O HRP catalisa o substrato TMB para criar coloração azul, com intensidade positivamente correlacionada com a concentração de IL-12 p70 na amostra. A reação é interrompida pela adição de solução de parada e a absorbância é medida a 450 nm (comprimento de onda de referência 570-630 nm). Uma curva padrão é desenhada para calcular a concentração de IL-12 p70 na amostra com base no valor de absorbância. Este kit é altamente específico, tem alta sensibilidade de detecção e é conveniente de usar.
Armazenamento
a 2 ~ 8 ° C no escuro por um ano
