SMART-Seq® mRNA LP (with UMIs), 24rxns
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O SMART-Seq mRNA LP (com UMIs) gera bibliotecas de mRNA-seq de comprimento total com oligo(dT) com UMIs, fornecendo maior precisão para análise quantitativa de expressão gênica em amostras, enquanto controla erros de PCR e vieses de amplificação. A química é otimizada para uso em quantidades ultrabaixas de RNA total (10 pg–100 ng, RIN≥8) ou para uso direto em várias células intactas (<1.000 células).
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A diferenciação de células DE de duas linhas de células hiPS separadas usando o Kit Cellartis Definitive Endoderm Differentiation com DEF-CS Culture Medium mostra os perfis de expressão de mRNA temporal esperados para marcadores endodérmicos CXCR4, FOXA2, SOX17 e SOX7 ; marcador mesoendodérmico Brachyury ; e marcador de pluripotência OCT4.
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As reações são montadas simplesmente misturando primers e molde de DNA com SapphireAmp Fast PCR Master Mix. Para uma triagem rápida e conveniente, as reações de amplificação podem ser carregadas diretamente em um gel de agarose imediatamente após a amplificação sem purificação ou digeridas diretamente com enzimas de restrição.
Para PCR de colônias baseadas em E. coli , inserções de até ~5 kb de comprimento são facilmente rastreadas; A PCR da colônia pode ser realizada em cerca de uma hora.
Para DNA genômico humano, a amplificação de alvos de 2 kb pode ser completada em uma hora; amplificações de até 6 kb são possíveis.