Chymotrypsin, Alpha, TLCK Treated, 25 mg

A quimotripsina é ativada através da clivagem da ligação entre arginina e isoleucina (R15 e I16) pela tripsina, causando modificações estruturais e formação do sítio de ligação do substrato (Sears 2010). A quimotripsina difere da tripsina porque a tripsina cliva os peptídeos em resíduos de arginina e lisina, enquanto a quimotripsina prefere grandes resíduos hidrofóbicos (Hedstrom et al. 1992). A quimotripsina catalisa preferencialmente a hidrólise de ligações peptídicas envolvendo L-isômeros de tirosina, fenilalanina e triptofano. Também atua prontamente sobre amidas e ésteres de aminoácidos suscetíveis. A especificidade da quimotripsina para grandes resíduos hidrofóbicos pode ser explicada por uma ligação hidrofóbica S1 formada pelos resíduos 189 a 195, 214 a 220 e 225 a 228 (Cohen et al. 1981).

Embora a estrutura do sítio S1 da tripsina e da quimotripsina mostre apenas uma diferença (na posição 189), a mutagênese sítio-dirigida da tripsina e da quimotripsina não conseguiu trocar especificidades, sugerindo que o mecanismo pelo qual a tripsina e a quimotripsina atingem a catálise específica do substrato não é totalmente compreendido. Steitz e outros 1969 e Gráf e outros 1988).

Características moleculares:

Quimotripsina A e B compartilham 80% de identidade de sequência (Hartley 1964, Meloun et al. 1966, Smillie et al. 1968 e Gráf et al. 2004). Os aminoácidos da tríade catalítica (H57, D102 e S195) são altamente conservados nas sequências das peptidases da família S1 (Gráf et al. 2004). A serina na posição 214 também é altamente conservada na família e foi proposta como o quarto membro da tríade catalítica (Ohara et al. 1989, e McGrath et al. 1992).

Composição:

Os três resíduos de aminoácidos da tríade catalítica (H57, D102 e S195) são essenciais para a clivagem da ligação peptídica e são estabilizados por ligações de hidrogênio (Sears 2010 e Gráf et al. 2004). G193 e S195 formam o buraco oxiânion e interagem com o grupo carbonila da ligação peptídica cissil, orientando-o para formar o intermediário tetraédrico (Rühlmann et al. 1973, Huber e Bode 1978, e Gráf et al. 2004).