Nota A concentração ótima para RNase A é de 1-100 ug/ml, dependendo da aplicação. |
A enzima é ativa sob uma grande variedade de condições de reação. Em baixas concentrações de sal (NaCl 0 a 100 mM), a RNase A cliva o RNA de cadeia simples e de cadeia dupla, bem como a cadeia de RNA em híbridos de RNA-DNA. No entanto, em concentrações de NaCl de 0.3M ou superior, a RNase A cliva especificamente o RNA de cadeia simples. |
RNase A (Lyophilized Powder), 100mg
R$319,44
RNase A
N9046 (100MG)
Atividade específica: >2.500 u/mg proteínas (>units/mg proteínas)
Formato: contém 100mg de RNase A liofilizada.
Armazenar em temperatura ambiente por até um ano. Para um período maior armazenar em 4°C.
Descrição
RNase A, livre de DNase e proteases é uma endoribonuclase que degraga especificamente fitas únicas de RNA, clivando as ligações de fosfodiéster entre 5’ ribose do nucleotídeo e o grupo fosfato anexado a 3’ ribose de um nucleotídeo de pirimidina adjacente. O 2′, 3′-fosfato cíclico resultante é hidrolisado ao 3′ nucleosídeo fosfato correspondente.
Aplicações
Preparação de DNA genomico e plasmídeos
Remoção do RNA a partir de amostras de proteína recombinante
Ensaios de proteção à ribonuclease
Mapeamento de mutações de uma única base de DNA ou RNA
Controle de Qualidade
A ausência de endodesoxirribonucleases, exodeoxiribonucleases e proteases foi confirmada por testes de qualidade adequados. Funcionalmente testadas para a digestão de RNA em um procedimento de purificação de DNA plasmidial.
Fonte
Pâncreas bovino.
Peso Molecular
13,7 kDa monómero.
Definição de Atividade por Unidade
Uma unidade da enzima provoca um aumento na absorbância de 1,0 a 260nm quando RNA de levedura é hidrolisado a 37°C e pH 5.0
Cinquenta unidades equivalem a aproximadamente equivalente a 1 unidade de Kunitz
Inibição e Inativação
Inibidores: O inibidor mais potente é uma proteína de ~50 kDa a partir de citosol de células de mamíferos, por exemplo, RiboLock™ RNase inibidor.
Outros inibidores: uridina 2′, 3′ vanadato cíclico, 5′-difosfoadenosina 3′-fosfato e 5′-difosfoadenosina 2′-fosfato (2), SDS, dietil pirocarbonato, guanidínio tiocianato 4M mais 0,1 M de 2-mercaptoetanol e íons de metais pesados. Inativado por extração com fenol / clorofórmio.
Inativado por extração com fenol/clorofórmio.
Inativado por aquecimento a 95°C durante 10 minutos.
Disponível por encomenda
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O marcador 50 pb é ideal para determinar o tamanho do DNA de fita dupla de 50 a 500 pares de bases. A escada consiste em 8 fragmentos lineares de fita dupla. O fragmento de 250 pb está presente em intensidade aumentada para permitir fácil identificação. Todos os fragmentos são quantificados com precisão e misturados durante a produção.
Para carregamento de 5 ul, todos os fragmentos, exceto 250bp, são de 40 ng. O fragmento de 250 pb é de 100 ng.
O marcador é pré-misturado com corante e está pronto para uso.
Carregamento recomendado
2-5 ul
Concentração
Banda em evidência 100 ng / 5 ul
Outras bandas 40 ng / 5 ulCondição de eletroforese recomendada
8 cm, Gel de agarose a 3%, 0,5 × TBE, 5 V/cmConteúdo (bp)
50, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500 -
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HS Taq DNA Polymerase
P1082 (500U)
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10 x HSTM PCR Buffer (Mg2+ Plus) – 1.25ml
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HSTM Taq DNA Polymerase é uma enzima DNA polimerase termoestável derivada da bactéria Thermus aquaticus. O peso molecular da enzima é de 94kDa. HSTM Taq DNA Polymerase pode amplificar DNA de até 5kb. A velocidade de amplificação é de 0.9~1.2kb/min. A enzima tem atividade exonuclease 5’ – 3’, mas, não tem atividade 3’ – 5’ o que resulta em finalização com 3’-dA no produto da PCR.
Todos os componentes do HSTM PCR Buffer tem uma concentração ótima para amplificação eficiente. A atividade termoestável contribui para incorporação específica dos primers na amostra.10 x HSTM PCR Buffer (Mg2+ Plus)
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M7012 – DS View Nucleic Acid Stain, 20.000X
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Concentração: 20.000xO DSView é uma alternativa ao tradicional corante de brometo de etídio (EB) para detecção de ácido nucléico em géis de agarose. Emite fluorescência verde quando ligado ao DNA ou RNA. O corante DSView tem dois máximos de excitação de fluorescência: em 267 nm e outro em 294 nm. Além disso, também tem uma excitação visível a 491nm.
Armazenamento: guarde a 4ºC por até 2 anos.
Protocolo
1. Preparar 100 ml de solução de gel de agarose (concentração de 0,8 a 2%) e misturar completamente. Coloque o frasco no microondas, aqueça até que a solução esteja completamente limpa e não haja partículas flutuantes pequenas visíveis (cerca de 2 ~ 3 minutos).
2. Adicione 2-5μl de DSViewTM à solução de gel. Agite o frasco suavemente para misturar a solução e evite formar bolhas.
3. Enquanto a solução de gel esfria, despeje-a na bandeja de gel até que os dentes do pente estejam imersos cerca de 1/4 ~ 1/2 na solução de gel.
4. Permitir o gel de agarose esfriar até solidificado. Coloque amostras no gel e corra a eletroforese.
5.Detectar as bandas sob iluminação UV.